濒危植物望天树SSR－PCR反应体系的优化.PDF

( )，2011 ，33 (S2):425 ～ 432 CN 53 － 1045 / N ISSN 0258 － 7971 云南大学学报 自然科学版 Journal of Yunnan University http :/ / www． yndxxb． ynu． edu． cn ＊ ? 濒危植物望天树SSR － PCR 反应体系的优化 1，2 1 ， 张美玲 李巧明 (1． ， 650223 ; 中国科学院西双版纳植物园植物系统与保护生物学试验室 云南昆明 2 ． ， 100039) 中国科学院研究生院 北京 16 5 : (Parashorea chinensis) SSR － PCR ， L (4 ) ， SSR 摘要 为探索适宜望天树 的 反应体系 利用 正交试验设计 对 － PCR 5 (dNTPs 、 、DNA 、Mg2 + 、Taq DNA ) ． ， 反应体系中的 个反应组分 引物 模板 聚合酶 进行优化 结果显示 各 SSR － PCR : DNA ＞ dNTPs ＞ ＞ Mg2 + ＞ Taq 因素水平的变化对望天树 反应的影响由大到小依次为 模板 引物 DNA ． SSR － PCR : 25 L ，10 × buffer (Mg2 + 聚合酶 最终建立了适合望天树 分析的最佳反应体系 在 μ 反应体系中 Free)2 ． 5 L ， DNA 30 ng ，dNTPs 20 mmoL / L ， 13 moL / L ，Mg2 + 50 mmoL / L ，Taq DNA 0 ． 5 U． μ 模板 引物 μ 聚合酶 利 ， 3 12 ， 用该优化体系 采用 对不同引物对 份分布于不同地区的望天树材料进行了检验 证明此反应体系具有较 好的稳定性和可重复性．