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猪传染性胃肠炎病毒
第四节 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) 一、生物学特性 二、抵抗力 三、抗原性 四、培养特性 五、致病性 六、微生物学诊断 七、预防与治疗 猪传染性胃肠炎(transmissible gastroenteritis of pigs,TGE)是由传染性胃肠炎病毒引起的急性、高度接触性为肠道传染病。 各年龄的猪均能感染,十日龄以内的仔猪最易感染,七日齢以内的仔猪感染发病死亡率可达100%,但随着年龄的增长,死亡率逐渐降低,成年猪感染后几乎没有死亡, 但会严重影响猪的 增重并降低饲料报酬。 一、生物学特性 传染性胃肠炎病毒属于冠状病毒科冠状病毒属。 TGEV病毒粒子多呈圆形或椭圆形,直径为80-120nm,有囊膜,其表面有一层棒状纤突,长约12-25nm。 TGEV基因组为不分节 段的单股正链RNA, 大小约28.5kb。 二、抵抗力 猪传染性胃肠炎病毒对乙醚、氯仿、去氧胆酸钠及光敏感。病毒在胆汁中相当稳定。对胰酶有抵抗力。病毒在pH4~8时稳定 ,并且在一定pH下,温度越高,灭活越快。此外,病毒在冻结保存时极为稳定 。 本病毒SH株和TO株在4℃条件下能凝集鸡、鼠和牛的红细胞,但不凝集小鼠和鹅的红细胞。 三、抗原性 对来自美国、英国和日本的10个毒株(包括用猪传代和用细胞培养物传代的毒株) 进行交叉中和试验和蚀斑减数试验,证明TGEV只有1个血清型,各毒株之间有密切 的抗原关系。而且TGEV与猫传染性腹膜炎病毒和犬冠状病毒之间存在抗原相关性 。特别是与PRCV的核苷酸和氨基酸序列有96%的同源性,并已证明PCRV是由TGEV突变而来。 四、培养特性 TGEV在细胞浆中增殖,不能在核内增殖,不产生包涵体。低代次的细胞培养传代病毒对无特定病原猪(SPF猪)有高度致死率,产生典型症状。高代次( 125代)细胞培养传代病毒的致病性显著降低。TGEV不易在鸡胚和各种实验动物体内生长。最近曾有犬能被实验感染的报道,但有待进一 步证实。 五、致病性 猪是唯一的易感动物,病猪和带毒猪是主要传染源,犬可参与本病的传播。 各种年龄的猪均有易感性,10日龄以内的仔猪最为敏感,发病和死亡率都很高,有时高达100%。 新疫区呈流行性,老疫区呈地方流行性或周期性流行;该病发生有明显的季节性,以冬春寒冷季节较为严重。 病猪的呕吐物与腹泻物,呕吐物中有未消化的凝乳块,粪便呈灰黄色、淡绿色或灰白色 发病仔猪迅速脱水、消瘦,极度口渴,被毛粗乱无光,后躯被粪便污染 病猪腹泻,象水枪样喷出 严重病例因脱水死亡 小肠充血膨大,肠壁变薄,呈半透明胶样外观,肠腔内积液积气 小肠绒毛萎缩变短,左为正常猪小肠绒毛,右为病死猪小肠绒毛 六、微生物学诊断 取腹泻早期病猪空肠和回肠的 刮削物做涂片,进行直接或间 接荧光染色,然后用缓冲甘油 封盖,在荧光显微镜下检查, 可见上皮细胞及沿着绒毛的胞 浆膜上呈现荧光者为阳性。 ②细菌检查 取病猪的心、肝、脾、肺、肾脏等组织直接涂片染色观察,未见细菌;再将心、肝、脾、肺、肾脏及肠道等样品无菌接种于普通平板和鲜血琼脂平板,37 ℃培养24~48 h观察,结果心、肝、脾、肺、肾脏无细菌,只有肠道接种有大肠杆菌生长,经小白鼠攻毒接种鉴定无致病性。(猪传染性胃肠炎防治) ③病毒检测 在小肠上皮细胞中检测TGEV抗原是一种简单和常用的方法。免疫荧光试验(IF)较常用,但为获得最佳结果,最好在腹泻早期感染细胞脱落前将猪扑杀,将空肠或回肠粘膜刮取物 或将空肠或回肠制备冷冻切片进行直接或间接IF染色。 ④血清学诊断 取急性期和康复期双份血清样品,经56 ℃灭活30 min,进行二倍法稀释,每个稀释度均与等量的本病毒悬液混合,置37℃ 60 min,然后取适量混合液接种PKl5细胞单层培养,经培养24~48 h观察结果,康复期血清滴度超过急性期5倍以上为阳性。 ⑤RT-PCR快速诊断法 根据TGEV标准毒株的基因序列,设计合成一对引物,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对发病猪的粪便进行检测,结果得到与预期大小相一致的扩增产物,则可正是该病毒为TGEV。 七、预防与治疗 不从疫区引种,以免病原传入; 母猪产前免疫,仔猪吮初乳获得被动免疫; 平时做好隔离消毒工作; 猪α干扰素对仔猪该病的发生有较好的预防作用; 抗生素防止细菌继发感染。 免疫保护主要是细胞免疫和局部黏膜免疫,体液免疫几乎无抵抗病毒的能力。 * ①免疫荧光法 TEGV感染猪的免疫荧光细胞 *
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