抗蛇毒血清1.pptVIP

抗 蛇 毒 血 清 抗蛇毒血清的研究现状 抗蛇毒血清的制备 抗蛇毒血清的作用原理 蛇毒种类 不同蛇毒致死量 中国十大毒蛇 抗蛇毒血清的定义 中 国 十 大 毒 蛇 白 眉 蝮 灰蓝扁尾海蛇 尖 吻 蝮 金 环 蛇 眼镜王蛇 银 环 蛇 烙铁头 圆 斑 蝰 舟山眼镜蛇 白唇竹叶青 银环蛇——1.0mg/kg 眼睛王蛇——12mg/kg 平额海蛇——3.5mg/kg 眼镜蛇——15mg/kg 蝰蛇——4.2mg/kg 蝮蛇——25 mg/kg 金环蛇——10mg/kg 竹叶青蛇——100mg/kg 不 同 蛇 毒 致 死 量 蛇 毒 种 类 血液循环毒素 如蝰蛇、腹蛇、竹叶青、五步蛇等。它造成被咬伤处迅速肿胀、发硬、流血不止，剧痛，皮肤呈紫黑色，常发生皮肤坏死，淋巴结肿大。经6-8小时可扩散到头部、颈部、四肢和腰背部。病犬战栗，体温升高，心动加快，呼吸困难，不能站立。鼻出血，尿血，抽搐。如果咬伤后4小时内未得到有效治疗则最后因心力衰竭或休克而死亡。 神经毒素 包括金环蛇、银环蛇等蛇分泌的毒素。咬伤后，局部症状不明显 ，流血少，红肿热病轻微。但是伤后数小时内出现急剧的全身症状，病人兴奋不安，痛苦呻吟，全身肌肉颤抖，吐白沫，吞咽困难，呼吸困难，最后卧地不起，全身抽搐，呼吸肌麻痹而死亡。 混合毒素 眼镜蛇和眼镜王蛇的蛇毒属于混合毒素。局部伤口红肿，发热，有痛感，可能出现坏死。毒素被吸收后，全身症状严重而复杂，既有神经症状，又有血循毒素造成的损害，最后，犬死于窒息或心动力衰竭。 细胞毒素 属眼镜蛇近亲的海蛇属于细胞毒素。海蛇毒液对人体损害的部位主要是随意肌，而不是神经系统。海蛇咬人无疼痛感，其毒性发作有一段潜伏期，被海蛇咬伤后30分钟甚至3小时内都没有明显中毒症状，然而这很危险，容易使人麻痹大意。实际上海蛇毒被人体吸收非常快，中毒后最先感到的是肌肉无力、酸痛，眼睑下垂，颌部强直，有点像破伤风的症状，同时心脏和肾脏也会受到严重损伤。被咬伤的人，可能在几小时至几天内死亡。多数海蛇是在受到骚扰时才伤人。 抗 蛇 毒 血 清 的 定 义 抗蛇毒血清是用蛇毒作为抗原 ,给实验动物反复进行注射免疫 ,一定时间后使实验动物产生一定要求量的抗体,然后采血分离提纯而成 ,是专供治疗毒蛇咬伤的特异性生物制品 ,同时为蛇伤患者提供速效、高效、特效的药物。注射抗蛇毒血清使人体立即获得对相应蛇毒的抵抗力 ,以中和蛇毒的毒性作用 ,这就是蛇伤的人工被动免疫。 抗 蛇 毒 血 清 的 作 用 原 理 形成抗原抗体复合物，使蛇毒失去毒性作用抗蛇毒血清是以蛇毒作为抗原免疫动物，动物受抗原刺激后，产生一系列的免疫反应，抗原经巨噬细胞的各类酶的作用下，抗原决定蔟与巨噬细胞的mRNA结合，将抗原(蛇毒)信息传递给T细胞，由T细胞传给B细胞，B细胞受到刺激产生抗体。所以抗蛇毒血清利用该原理制备的抗体，能与该抗原(蛇毒)特异性结合， 抗 毒 血 清 的 制 备 1、抗原制备 选择健康蛇取毒，新鲜毒液经2000．2500转离心处理15分钟左右，除去杂质，取上清经冻干成粉状备用。干燥之蛇毒需测定其毒力，应选择毒性强、抗原谱广(免疫电泳检验)的蛇毒作为抗原。 2、马匹免疫 将已除菌透析的蛇毒与配好的无菌油佐剂等量混合后用乳化器乳化,其抗原浓度分为0.12mg/ml和1mg/ml。 (1)前期免疫：马匹在进行蛇毒免疫前用浓缩破伤风类毒素进行两次前期免疫,以防止后期蛇毒免疫引起的破伤风。 (2)基础免疫：小剂量蛇毒抗原(每匹0.11~0.15mg)于马背部注射两针，每针间隔3周。 (3)超免疫：基础免疫后第2周测定马的血清效价,当有明显抗体应答反应后进行超免疫,超免疫剂量从每匹马1mg分5-10次加大到10mg,每次免疫间隔2周,免疫部位为皮下和肌肉、穴位交替进行。 3、采血 试血效价按1mL免疫血清与不同稀释度的眼镜王蛇蛇毒溶液等体积混合,于37℃结合45min后接种小白鼠,雌雄各半,每个稀释度注射4只,记录72h小鼠死亡情况,以能保护小鼠全部存活的一组作为其试血效价。1mL免疫血浆能中和1mg蛇毒后，采血,离心分离血浆,保存于-20℃ ,累积几次血浆后,混合并制备。 4、抗蛇毒血清精制 (1)IgG提取：每100ml血浆磁力搅拌下加入固体硫酸铵,使硫酸铵终浓度为50%,搅拌30min后离心, 取沉淀,加入原血浆体积的注射用水,搅拌至溶解, 加入固体硫酸铵,使硫酸铵终浓度为33%,搅拌至固体硫酸铵完全溶解后离心,取沉淀,沉淀加注射用水适量,搅拌至完全溶解、透析后离心,