应用荧光定量PCR对细粒棘球绦虫miRNAs在虫体-中国农学通报.PDF

中国农学通报 2012,28(26):63-66 Chinese Agricultural Science Bulletin 应用荧光定量PCR 对细粒棘球绦虫miRNAs 在虫体不同发育阶段表达量的研究 郝力力，李必富 （西南民族大学，成都610041） 摘 要：为确定通过Solexa 高通量测序鉴定出的大量细粒棘球绦虫miRNAs 序列在不同生活史阶段的表 达量。采用SYBR 染料法和Race 试剂盒相结合的荧光定量方法对原头节和生发层阶段的miRNAs 表达 进行了检测分析。结果表明：两阶段miRNAs 表达差异较大，其中mir-71、mir-7、mir- 1和mir- 19在生发 层阶段表达量较高，而let-7 则在原头节阶段表达较高。说明这些miRNAs 可能在细粒棘球绦虫发育阶 段的基因转录调控中起着重要作用。 关键词：细粒棘球绦虫；miRNAs ；荧光定量 中图分类号：Q78 文献标志码：A 论文编号：2012-2066 Quantification Analysis of miRNAs Expression Level in Different Developing Stages of Echinococcus granulosus Using Real-time PCR HaoLili,LiBifu (SouthwestUniversityforNationalities,Chengdu610041) Abstract: In this experiment, many new miRNAs in Echinococcus granulosus were discovered by high-throughout sequencing technology Solexa. To investigate the expression level of these miRNAs in differentlifestagesofEchinococcusgranulosus,Real-timePCRwasusedtorelativelyquantifythedominantly expressedmiRNAsinprotoscolexandgerminallayerbycombinationofSYBRGreenPCRandRacekit.Itwas foundthatmir-71,mir-7,mir-1andmir-19werehighlyexpressedatgerminallayerotherthanprotoscolex andlet-7 wasmoreabouduntinprotoscolexthangerminallayer.TheresultssuggestedthatmiNRAsmight play an important role in regulation of genes transcription in different developing stages of Echinococcus-granulosus. Key words: Echinococcusgranulosus;miRNAs;Real-timePCR 0 引言 是研究基因调控方向的一个热点，Illumina 公司的 [3-4] 细粒棘球蚴病是一种严重危害人类健康和畜牧业 Solexa 基因组分析仪广泛应用于miRNAs 的研究 ， 生产的人畜共患寄生虫病