科技创新实验一显微镜油浸系的使用及细菌基本形态观察.docVIP

实验一 显微镜油浸系的使用及细菌基本形态观察 目的要求 1．正确掌握使用及护理显微镜的方法，特别是油浸系的使用及护理。 2．认识细菌的基本形态和构造。 操作步骤 一、普通光学显微镜的构造 普通光学显微镜包括机械部分和光学部分两部分。机械部分包括镜座、镜臂、镜筒、载物台、物镜转换器、粗调节螺旋、细调节螺旋、标本夹等。光学部分包括接目镜、接物镜、反光镜、光圈（虹采）、聚光镜（集光器）等（图1-1）。 二、油浸系的原理 浸系是在油浸镜与标本之间加1滴香柏油，调整光源检查细菌标本的方法。油浸镜是一种高倍放大的物镜，一般都刻有放大倍数，如95x、100x等。其镜头标记国产镜多用“油”字表示，国外产品则用“Oil”（Oil Immersion）或HI（homogeneous Immersion）表示。而且油镜的镜身较高倍镜和低倍镜为长，镜片最小，这也是识别的另一种标志。其使用原理是：由于香柏油与玻璃的折光率相似（香柏油为1.515，玻璃为1.52）。镜检时，滴加香柏油的作用是使光源尽可能多的进入物镜中，避免光线通过折光率低的空气（折光率为1.0）而散失，因而能提高物镜的分辨率，使物像明亮清晰（见图1-2）。 三、使用方法 镜检者需姿势端正，一般用左眼观察，右眼用于绘图和记录，两眼同时睁开，以减少疲劳。光源用自然光线或人工光源，注意避开直射日光。用人工光源时，为了避免赤黄光线，需在集光镜下装入蓝色滤光片。 对光 将光圈完全开放，升高聚光镜与载物台同高，置标本片于载物台上，在低倍镜下对光，用手转动反光镜以调节之，至视野最亮时为止。若用天然光源宜用反光镜平面，较弱光源用凹面。检查未染色标本，光不宜太强，染色标本需强光。光线强弱可通过放大或缩小光圈、升降聚光镜、旋转反光镜调节之。 加油 将标本放在载物台上，染色部位正对集光器的中央，用标本夹固定好，滴加香柏油1滴，用油浸镜检查，使油镜头浸入油滴中，几乎与标本面接触为度，然后由接目镜注视镜内，同时慢慢转动粗调节螺旋提起镜筒（绝对不能下降镜筒！）至能模糊看到物像时，再转动细螺旋（细螺旋转动一般不超过一周），直至物像清晰为止。 四、显微镜的保护 （一）从镜箱内取显微镜时，应以右手持镜臂以水平方向慢慢抽出，不得碰镜，再以左手托镜座，保持镜体平行，以防反光镜及接目镜滑落。 （二）显微镜各镜头绝对不可用手指拭抹，应用擦镜纸或用绸布轻拭之。油镜用过后，立即用擦镜纸拭之，若油渍已干，则需用擦镜纸蘸二甲苯拭之，然后用干燥镜纸轻拭之。镜体可用软布轻拭，以保持清洁。 （三）用过后应将显微镜各部复位，尤其注意不要让接物镜对集光器，同时把集光器下降，以免发生碰撞，然后置镜箱内锁好。 （四）注意防潮，勿靠近热源及有腐蚀性的化学药品。显微镜各零件不要任意拆卸，尤其是光学部分，以免损坏。 五、细菌正常形态的观察 练习显微镜油浸系的使用，观察已制好的细菌染色标本，如葡萄球菌、链球菌、四联球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、螺旋状菌及细菌的荚膜、芽胞和鞭毛，并进行绘图。 图1-1 光学显微镜的结构 图1-2 显微镜油浸系的原理