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tlc原理与技术1 薄层层析目录一、薄层层析（TLC）简介?2（一）吸附薄层的基本原理：?2（二）薄层层析条件的选择：?21.概述：?22.吸附剂：?3（1）?氧化铝：?3（2）?硅胶：?33.展开剂：?34.被分离成分：?3（三）分配薄层层析：?4（四）?薄层的制备：?4（五）?薄层层析的操作步骤：?4二、展开剂的选择与常见溶剂的极性?5（一）展开剂的选择：?5（二）展开剂的极性?5（三）应用实例?61、药物及天然产物中的应用?6（1）极性较小的挥发性物质。?6（2）极性较小的不挥发性物质。?7（3）皂苷类。?7（4）极性大的小分子有机酸。?7（5）含氮有机物。?72、有机合成中展开剂的选择?73、薄层色谱在中草药中的应用?9三、显色方法?11（一）.?概述?11（二）．通用显色剂?11（三）.?专属性显色剂?12（四）.其他常用与专用显色剂：?21四、薄层层析法具体操作注意事项?22（一）铺板?22（二）点样?22（三）展开剂配制?22（四）展开系统的饱和?23五、TLC切记的要点?23 ? 一、薄层层析（TLC）简介　　薄层层析是将吸附剂或者支持剂（有时加入固化剂）均匀地铺在一块玻璃上，形成薄层。把欲分离的样品点在薄层上，然后用适宜的溶剂展开，使混合物得以分离的方法。由于层析在薄层上进行故而得名。　　薄层层析是一种微量、快速的层析方法。它不仅可以用于纯物质的鉴定，也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定。还可以通过薄层层析来摸索和确定柱层析时的洗脱条件。根据分离的原理不同，薄层层析可以分为两类：用吸附剂铺成的薄层所进行的层析为吸附薄层层析，吸附薄层中常用的吸附剂为氧化铝和硅胶；用纤维素粉、硅胶、硅藻土为支持剂铺成的薄层，属于分配薄层层析。　　　　??吸附TLC→固定相为吸附剂→氧化铝、硅胶。（较多用）TLC→　　　　??分配TLC→固定相为液态（通常为水）→固定相吸附在支持剂上。（一）吸附薄层的基本原理：　　吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同，及展开剂对它们的解吸附能力的不同，使各成分达到分离。　　吸附作用主要由于物体表面作用力、氢键、络合、静电引力、范德华力等产生。吸附强度决定于吸附剂的吸附能力，还受被吸附成分的性质影响，更与展开剂的性质有关。　　1.吸附薄层层析：在硅胶薄层板上，样品中的两成分是两种结构近似的染料，在展开剂四氯化碳的作用下。在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸，再吸附，再解吸，……。由于对氨基偶氮苯的极性比偶氮苯的极性稍强一些，层析的结果，对氨基偶氮苯受到的吸附作用稍强于偶氮苯，从而将两者分离。　　展开结束以后，会在薄层板上形成两个斑点，混合物中的成分得以分离。　　中药中的有效成分复杂多样，结构近似者不少。特别是对未知结构的成分分析，设计并摸索出合理的层析条件是首要任务。只有先设计出可用的层析条件，再经摸索改进，才可能对未知或者已知成分进行成功地分离。然后才能谈得上进一步的分析研究。要设计出合理有效的层析条件，必须熟悉薄层层析条件的选择的基本要领。下面对薄层层析条件的选择做一初步介绍。　　薄层层析的三项基本构成物质是：样品组分、吸附剂、展开剂。摸索层析条件，实际上是协调上述三者的关系，寻求一种能够有效分离样品组分的配合方案及实际操作要领。很明显，一切层析都是针对分析任务，也就是围绕待分离的样品组分来进行调整适应的。可见，层析条件的选择是以样品中的各组分为中心，适当调适展开剂的吸附剂的极性来实现的。（二）薄层层析条件的选择：?????1.概述：?吸附剂的选择：薄层层析用的吸附剂与其选择原则和柱层析相同。主要区别在于薄层层析要求吸附剂（支持剂）的粒度更细，一般应小于250目，并要求粒度均匀。用于薄层层析的吸附剂或预制薄层一般活度不宜过高，以～级为宜。而展开距离则随薄层的粒度粗细而定，薄层粒度越细，展开距离相应缩短，一般不超过10厘米，否则可引起色谱扩散影响分离效果。展开剂的选择：薄层层析，当吸附剂活度为一定值时（如或级），对多组分的样品能否获得满意的分离，决定于展开剂的选择。中草药化学成分在脂溶性成分中，大致可按其极性不同而分为无极性、弱极性、中极性与强极性。基本思路是根据待分离样品组分的极性来确定吸附剂的极性（类型、活化度）和展开剂的极性（主要溶剂、调节溶剂、辅助溶剂等）。要协调、处理好吸附剂、展开剂、及被分离成分三者之间的关系，才能得到理想的薄层层析结果。2.吸附剂：对吸附剂的基本要求是颗粒细致(薄层层析用的吸附剂与其选择原则和柱层析相同。主要区别在于薄层层析要求吸附剂/支持剂的粒度更细，一般应小于250目，并要求粒度均匀)、大小均匀（亦即有较大的表面积和适当的吸附活性