046—余鸿毅—氨基酸的薄层层析—制药工程—第2实验室.docVIP

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046—余鸿毅—氨基酸的薄层层析—制药工程—第2实验室

生物化学实验报告 姓 名: 余鸿毅 学 号: 3120206046 专业年级: 2012级制药工程(中药) 组 别: 第2实验室 生物化学与分子生物学实验教学中心 实验名称 (Title of Experimetn) 氨基酸的薄层层析 实验日期 (Date of Experiment) 2013/12/25 实验地点(Lab No.) 第2实验室 合作者(Partner) 黄浩集 指导老师(Instructor) 尹虹 总分 (Total Score) 教师签名(Signature) 批改日期 (Date) 实验原理: 薄层层析是是色谱分析技术的一种。将固体吸附剂涂布在平板上形成薄层作为固定相。当液相(展展开溶剂)在固定相上流动时,由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样,不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样,点在薄板上的不同氨基酸随着展开剂的移动速率也不同,因而可以彼此分开。(即通过吸附-解吸-再吸附-再解吸的反复进行,而将样品各组分分离开来)。本实验应用硅胶作为固相支持物,用羧甲基纤维素钠作为粘合剂,以正丁酸、冰醋酸及水的混合液为展开剂,测定混合氨基酸中各分离斑点的Rf值(物质迁移的距离与溶液前沿的距离比。)因为物质在某溶剂中的分配系数是一定的,故Rf值恒定,因此可以根据Rf值来鉴定被分离的物质。 茚三酮水化后生成水化茚三酮,它与氨基酸发生羧基反应生成还原茚三酮、氨基醛,与此同时,还原茚三酮又与氨基茚三酮缩合生成紫红色化合物而使斑点氨基酸显色。 . 实验材料:实验样品: 混合氨基酸溶液 主要试剂: 吸附剂:硅胶 粘合剂:0.5%% 实验数据: 样品 斑点-原点 溶剂前沿-原点 Ala Gly Arg 混合点1 混合点2 混合点3 2.32cm 5.8cm 1.70cm 5.8cm 0.87cm 5.8cm 0.85cm 5.8cm 1.45cm 5.8cm 1.98cm 5.8cm 实验结果:混合氨基酸一共含有3种氨基酸。 各斑点 Rf值 氨基酸名称 Ala Gly Arg 混合点1 混合点2 混合点3 0.400 0.293 0.150 0.147 0.250 0.341 结果与讨论:1、硅胶的吸附力与含水量的问题 答:在一定温度下,含水量越少,硅胶活性越高,吸附能力越强。 2、由于点样操作不慎,实验结果中出现了拖尾。

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