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糖尿病大鼠同病异证及异病同证探究
糖尿病大鼠同病异证及异病同证探究摘要 目的:观察不同糖尿病(Diabetes mellitus,DM)模型大鼠的同病异证与异病同证情况。方法:采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,或结合高脂饲料喂养造模,根据血糖诊断为隐性DM大鼠、2型DM大鼠、1型DM大鼠;同步检测体重、饮水、摄食、腋温、心率、爪、尾显微放大拍照及图像处理得到r值、水平跨格数和垂直站立数、抓力,求出正常对照组各指标均数及各组的实测值与正常对照组均数的比值,制定阴虚程度、气虚程度、阳虚程度及胃热程度等计量辨证方法,对各组四诊进行比较。结果:①糖尿病大鼠出现了典型的同病异证。例如1型糖尿病同一大鼠,在不同阶段其阴虚程度和阳虚程度相差较大;1型糖尿病不同大鼠,不同阶段和同一阶段的证候均相差较大;2型糖尿病大鼠也有类似现象。②糖尿病大鼠出现了典型的异病同证。例如1型、2型糖尿病大鼠在同一阶段可以见到阴虚、阳虚和气虚程度非常接近的现象;不同阶段的不同糖尿痛大鼠也有相同的证候类型。结论:糖尿病大鼠存在典型的同病异证、异病同证,其证候及其严重程度是可以通过非创伤性四诊定量采集和辨证的,这样的定量辨证结果有助于糖尿病大鼠的辨证论治及其疗效评价。 关键词 糖尿病链脲佐菌素 大鼠 同病异证异病同证 中医药实验研究已大量使用STZ糖尿病模型大鼠,但隐性DM、2型DM以及1型DM是否存在特殊证候、复合证候,以及是否会出现同病异证、异病同证的情况?能不能准确、定量地采集和刻画这样的特征?这样的学术问题不解决,便难以开展中医药糖尿病辨证论治的基础研究。对此,我们采用STZ造模,对不同血糖浓度的糖尿病大鼠不同阶段进行四诊标准化、客观化检测,并计量辨证,探索糖尿病模型大鼠的病与证关系,现报道如下。 1 材料与方法 1.1 实验动物:清洁级SD大鼠,180~200g,雌性,72只,由上海中医药大学实验动物中心提供,根据造模方法的要求完全随机分为6组。 1.2 实验仪器:721分光光度计,MPl001型电子天平,XD27100单道心电图机,自制大鼠心电采集装置,数字WMY201型温度计,SQF2EA体视显微镜,3200K(色温)500w摄像专用光源和普通光源,NI―KON C001pix4500数码相机,Photoshop7.O图像软件,SPSSll.5统计软件。 1.3 实验材料:STZ购自Sigma-Aldrich(上海)贸易有限公司;血糖测定试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供;高脂饲料配方为基础饲料54%,猪油16%,绵白糖27%,蛋黄粉2%,胆固醇0.5%,胆酸钠0.5%。 1.4 造模方法:在归纳整理以往文献报道的基础上,选取三种糖尿病模型,详见表1。 1.5 检测指标及方法:分述于下。 1.5.1 四诊检测指标及方法:参考课题组所建立的小鼠四诊检测与辨证方法。①四诊检测指标:饮水量、摄食量、体重、腋温、自然状态心电图、爪、尾显微拍照及图像处理、旷场水平跨格和垂直站立、抓力。分别于第1d、8d、15d、24d、30d、38d、44d、54d、60d、67d、72d对以上指标进行检测。②计量辨证处理及标准:制定标准原则为鉴于不同批次动物和不同性别、月龄动物,以及不同疾病证候的特殊性,辨证标准要求依据各实验的实测值及其离散程度进行调整,调整后所确立的标准适用于该批次动物不同组别、不同时间检测与辨证,保证标准的一致。此批糖尿病大鼠常见证候标准如下;阴虚程度=各动物体重/正常组体重均数。辨证标准:与正常组比较,大于1.2为形丰,小于0.9为阴虚,小于0.8为阴亏,小于0.7为阴竭。气虚程度一各动物抓力/正常组抓力均数。辨证标准:与正常组比较,大于1.25为气盛,小于0.95为偏气虚,小于0.9为气虚,小于0.8为气亏,小于0.7为气损。阳虚程度一各动物腋温/正常组腋温均值×0.6+各动物心率/正常组心率均值×0.4。辨证标准:与正常组比较,大于1.02为阳盛,小于0.95阳虚,小于0.90阳亏,小于0.80为阳竭。胃热程度一各动物饮水量/正常组饮水均值×0.5+各动物摄食量/正常组摄食均值×0.5。辨证标准:与正常组比较,大于2为胃热,大于3为胃火,大于4为胃火盛。各组计量辨证值大小排序,赋予单证候名,然后组合成复合证候名。单证候名如:形丰、正常、阴虚、阴亏、阴竭;气盛、正常、气虚、气亏、气损;阳盛、正常、阳虚、阳亏、阳竭;胃热、胃火、胃火盛;复合证候名如:气阴两虚、阴阳两虚、阴虚胃热等。 1.5.2 疾病特殊检测指标及方法:①检测指标及方法:采用氧化酶法于第16d、第31d、第46d和第74d各测定1次空腹血糖及糖耐量2小时血糖。②此批动物血糖诊断标准:隐性DM:空腹血糖稍高于正常但小于11.1mmol/L或糖耐量2小时血糖稍
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