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电针对慢性疲劳大鼠模型下丘脑一垂体一肾上腺轴激素水平影响
电针对慢性疲劳大鼠模型下丘脑一垂体一肾上腺轴激素水平影响 杨文佳 符胜光 张晓丹 摘 要:目的:观察电针对慢性疲劳大鼠模型下丘脑一垂体一肾上腺轴(HPA-axis)激素水平的影响,探讨电针(EA)治疗慢性疲劳综合征(CFS)的作用机理。方法:设正常组、模型组、电针组,模型组与电针组采用强制性冷水游泳的方法制作CFS大鼠模型,电针组在造模的同时在百会、足三里穴给予电针治疗。通过行为学检测对模型进行判定;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT)的含量;采用放射免疫分析法测定大鼠血清下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量。结果:①电针对慢性疲劳大鼠行为学的影响:模型组大鼠行为出现改变,产生了心理和躯体的疲劳状态,基本符合或类似于cFs的临床表现。电针对疲劳大鼠模型的心理和躯体疲劳状态有显著良性调节作用。②电针对慢性疲劳大鼠HPA轴的影响:模型组大鼠HPA轴功能出现异常,血清ACTH、CORT和CRH含量明显上升;电钟能明显降低血清ACTH、CORT和CRH的浓度,使HPA轴功能恢复正常。结论:①CFS与应激关系密切。采用强制性冷水游泳制作的慢性疲劳大鼠模型与CFS的发病机制和临床表现基本相符。②电针治疗CFS的机制可能与其对HPA轴功能的调节有关。电针可调节血清ACTH、CORT和CRH的浓度,在3个层次对HPA轴的激素进行调节,以纠正CFS异常的HPA轴功能,达到治疗CFS的目的。 关键词:电针;慢性疲劳综合征;下丘脑一垂体一肾上腺轴:大鼠 慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)是1988年美国疾病控制中心正式命名并拟定了相应诊断标准的一种新的疾病。CFS的病因和发病机制尚未明确,目前普遍认为CFS可能是由于诸多原因作用机体而导致神经一内分泌一免疫网络紊乱的结果…。针对CFS的治疗尚无特效药物,针灸以其独特的疗效及安全、无毒副作用的特点,已成为CFS理想的非药物疗法之一。大量临床实验表明,针灸在治疗CFS方面具有显著疗效。但是目前有关针灸治疗CFS作用机理的研究较少,本实验从针灸治疗CFS临床有效这一实践基础出发,通过电针干预慢性疲劳大鼠模型,观察电针对HPA轴的激素水平的调节作用,探讨电针在CFS的神经内分泌调节中的作用,现将结果报道如下。 1 材料与方法 1.1动物及分组健康Wistar雄性大鼠33只,清洁级,体重160-1808,由上海中医药大学实验动物中心提供。动物饲养环境:清洁级实验室饲养,温度120-25℃,湿度40%-70%,噪声<60分贝,工作照度12h明12h暗,自由进食颗粒饲料及饮水。饲养1周后,随机分为正常组、模型组和电针组,每组11只。 1.2模型制备,每日让大鼠在冷水(10±1)℃中游泳,并改变造模开始及持续的时间,每次造模持续时间为6-10min,共造模9天。 1.3 电针方法电针组于造模之日进行电针治疗。参照《实验针灸学》选取“百会”、“足三里”穴,以30号0.5寸毫针进行针刺,“百会”平刺0.3-0.5寸,“足三里”直刺0.5-0.8寸。针柄接C,6805电针治疗仪,电压6V,疏密波型,频率2/20Hz,强度以局部皮肤肌肉轻微颤动为度,电针20min,每日1次,共治疗9天(足三里左右两侧交替使用,每次取单侧)。 1.4 行为学测定水迷宫实验:选用Moils水迷宫,规格:直径150cm,高50cm,内设一低于水面的平台,测试大鼠从两个固定点入水到找到平台所需的平均时间。各组动物均于造模前2天对大鼠实施水迷宫训练,造模前1天进行水迷宫测试,记录大鼠找到平台所用的时间,作为大鼠学习成绩。造模结束后第1天再次测试各组大鼠水迷宫实验找到平台所需的时间,作为大鼠的记忆成绩。 Open-Field法行为测定:各组动物均于造模结束后第1天进行,开阔箱规格为100cm×100cm×50cm,周壁、底面为黑色,底面用白线分割为面积相等的25块。将大鼠放入开阔箱的正中格,观察大鼠6min的活动情况。测定指标包括:①正中央格停留时间;②方格间穿行次数(3爪以上跨入邻格的次数);③竖起或修饰次数(两前肢离地1cm以上的次数;④竖起或修饰时间(两前肢离地1cm以上的时间)。 鼠尾悬挂实验:各组动物均于造模结束后第2天进行。将大鼠尾端2cm的部位贴在一水平板上(板离地1m左右),使动物呈倒挂状,计算6min内的不动时间。 力竭游泳时间:各组动物均于造模结束后第2天进行,游泳池规格为150cm×70cm×100cm,水深50cm,水温(28±1)℃,将大鼠置人游泳池,记录大鼠从人水到游泳至力竭(头部沉入水中10s中不能浮出水面为力竭标准)的时间。 1.5主要试剂及仪器AC
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