第12章分子发光-荧光与磷光1.pptVIP

2. 分子的活化与去活化 分子的活化与去活化 RLS 荧光分析与分光光度分析的区别:  灵敏度： (1) 入射光强度与溶液浓度的关系 (2) 荧光分析灵敏度高于分光光度分析2~4 个数量级, 可达到质量分数为10-9以上数量级, 适于分析微量试样 (3) 增大荧光入射光强度,可提高荧光分析灵敏度 荧光产生的机制: 激发光谱与吸收光谱形状相同 荧光光谱与吸收光谱形状相似,镜像对称 荧光光谱只有一个荧光带,而吸收光谱有几个吸收带. 荧光分析优点: 灵敏度高 选择性好 方法简捷 重现性好 取样量少 三. 金属螯合物的荧光 无机盐的荧光 镧系元素(III)化合物， U(VI)化合物， 类汞离子化合物Tl(I), Sn(II), Pb(II), As(III), Sb(III), Bi(III), Se(IV), Te(IV) 过渡金属Cr(III), Re(I), Ru(II), Os(II). Pt(II), Rh(III), Ir(III) 二元配合物的荧光 不发荧光的无机离子与有吸光结构的有机试剂发生配合，生成会发荧光的配合物。 三元配合物的荧光 离子缔合物： （1）阳离子荧光染料－金属配阴离子 罗丹明类，吖啶橙，吖啶黄和藏红等 卤素离子及SCN-离子等 Ga(III), Sn(II), Ta(V), Te(IV), In(III), Tl(III), Zn(II)和Mo(V)等 （2）阴离子荧光染料－金属配阳离子 曙红，荧光素类等 吡啶类，邻菲绕啉等 Ag(I), Zn(II)和Cd(II)等 四. 荧光的熄灭 紫外-可见分光光度计测量池(吸收池) 二. 光源 1. 光源的要求： 发射强度足够且稳定的连续光谱 光辐射强度随波长的变化小 有足够长的使用寿命 2.氙灯光源 常用气体放电灯类型： 氙灯光源 高压汞光源 波长范围：200~1000nm 工作压力：5~20 atm 启动电压：20~40KV 使用寿命：1000~2000h 最广泛应用的连续光源： 发射波长范围宽 发射光强度大 3. 高压汞灯光源 应用广泛的线光源： 253.7 296.5 302.2 312.6 313.2 365.0 365.5 366.3 404.7 435.8 546.1 557.0 579.0 (nm ) 光源 样品池 激发 滤光片 检测器 数据处理 仪器控制 发射 单色器 光源 样品池 激发 滤光片 检测器 数据处理 仪器控制 发射 滤光片 玻璃滤光片的透射率 干涉滤光片的透射率 截止涉滤光片的透射率 三. 单色器 平面衍射光栅 线色散率 聚光本领 分辨率 四. 检测器 光电倍增管 放大倍数：2n~5n;n=10,103~107， 最大108~109 五.样品池：液池、荧光池 1.样品池的材料：与紫外-可见分光光度计的吸收池一样 2. 吸收池的形状：紫外-可见分光光度计的吸收池两面透光 荧光分光光度计的样品池四面透光 波长范围 3. 使用注意事项 容易破碎 问题：紫外-可见分光光度计的吸收池与荧光分光光度计的样品池有什么区别？ 沾污问题 闪跃特性 六. 磷光分光光度计 1. 光学系统与荧光分光光度计的区别 光源 样品池 激发 单色器 检测器 数据处理 仪器控制 发射 单色器 切光器（斩波器） 共振荧光：10-12 sec 荧 光：10-8 sec 磷 光：1~10-4 sec 迟滞荧光：100~10-4 sec 2. 样品池与荧光分光光度计的区别 通常情况下，样品池需要放在盛液氮的石英杜瓦瓶内，来测定低温磷光。 §12.４ 荧光分析法的应用 一. 工作曲线法 荧光分析的灵敏度比紫外－可见分光光度法高103～104. 荧光熄灭工作曲线法 Fx F Cs Cx 直接荧光标准曲线法 F Cs Fx Cx 二. 荧光分析法的灵敏度 在紫外光照射下会发生荧光的无机化合物很少，主要依赖于有机试剂形成的螯合物。 三. 荧光分析的应用 1. 无机化合物 直接荧光测定法 其中，较常测定的元素有：Be、Al、B、Ga、Se、Mg、Zn、Cd与某些稀土元素；测定的灵敏度有些可以达到10-10; 某些元素虽然不与有机试剂形成发荧光的配合物，但是它会与发荧光的配合物争夺配位体，组成不发荧光的配合，使其产生荧光熄灭，由荧光熄灭的强度此该元素的含量。 较常测定的元素有：F、S、Fe、Ag、Co、N