菩人丹胶囊对2型糖尿病大鼠胰岛功能的影响.docVIP

　　菩人丹胶囊对2型糖尿病大鼠胰岛功能的影响 ：郝祥俊，贾春华，杜金凯，庞宗然 【摘要】 目的观察苦瓜复方-菩人丹(PRD)胶囊的降糖效果，并探讨其可能的降糖作用机理。方法将苦瓜、人参、丹参等按一定比例组成处方，应用 现代 制剂技术将其制成胶囊剂。喂食以链脲佐菌素(STZ)造成的糖尿病大鼠，以二甲双胍为阳性对照药物，观察PRD降血糖及对大鼠胰岛A、B细胞的影响。结果PRD能明显降低糖尿病大鼠空腹血糖值，从空腹血糖的动态观察结果来看，PRD 治疗 组作用缓慢而持久，而二甲双胍组作用较强;胰岛细胞学结果：PRD治疗组与阳性对照药二甲双胍组比较，胰岛B细胞数量较多，胞体较大，颗粒较多;而胰岛A细胞则无明显差异。结论PRD具有降糖功效，其降糖效果的产生，可能在于PRD降低胰岛素抵抗。 【关键词】 菩人丹胶囊;苦瓜;血糖;2型糖尿病;胰岛AB细胞 　糖尿病属祖国医学“消渴病”的范畴，以多饮、多食、多尿为主证。许多研究表明糖尿病的基本病理是“气阴亏损”“瘀血阻滞”，同时“气阴不足，脉络瘀阻”也成为糖尿病并发症产生的病理基础。“益气养阴，泻热逐瘀”由此成为治疗糖尿病及其并发症的主要治则[1]。基于上述认识，贾春华教授[2]经过长期的临床实践，通过对糖尿病病因、病机、治法方药的反复研究与 总结 ，研制出以苦瓜为主的中药复方—菩人丹胶囊(PRD)，结合免疫细胞化学技术，观察其对2型糖尿病大鼠胰岛功能的影响，并探讨其可能的降糖作用机理。 　　1材料与仪器 　　1.1动物a公司(美国)生产，葡萄糖、磷酸盐缓冲试剂(PBS)、一抗、二抗、三抗、胰岛素(Ins)检测试剂盒，为北京中山试剂有限公司产品。 　　1.4仪器AU640奥林帕斯全自动生化分析仪，GC911/R放射免疫计数器， 中国 科技大学实业总公司生产。 　 　2方法 　　2.1糖尿病大鼠模型的复制mol/L为糖尿病合并高脂血症模型大鼠。 　　2.2观察指标 　　2.2.1PRD对STZ糖尿病大鼠空腹血糖、空腹血清胰岛素的影响挑选造模成功的30只糖尿病大鼠，随机分成模型组、阳性对照组(二甲双胍治疗组)、PRD治疗组，每组10只。另选10只健康鼠为空白对照组。二甲双胍对照组以0.14 g·kg-1·d-1灌胃，PRD治疗组以0.65 g·kg-1·d-1灌胃;空白对照组及模型组灌服相应容量的蒸馏水;各组动物每天灌胃2次，连续4周。于治疗(1，2，3，4 周)后，禁食、水8h，眼眶采血，离心血清，分别测定空腹血糖值。给药第4周后，各组实验动物于末次给药前禁食、水8 h，眼眶静脉采血，测定空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(Ins)含量。 　　2.2.2PRD对STZ糖尿病模型大鼠胰岛A、B细胞的影响灌胃4周后，各组实验动物断头处死，取胰腺用10%福尔马林固定，常规石蜡包埋。德国进口AO切片机切片4张，裱于多聚赖氨酸载片上，实验指标有胰岛素胰高血糖素。切片免疫组化染色具体操作步骤按试剂说明进行;DAB-H2O2显色3~5 min;水洗后，苏木素复染，盐酸酒精分色，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。阴性对照切片与其相应的实验片裱在一张载片上，以PBS代替一抗，随其它标本一起染色，每批染色均设空白对照，光镜观察各组实验动物胰岛组织中A细胞、B细胞的变化。 　　2.3统计学处理数据以±s表示，前后比较采用t检验;组间比较采用F检验。 　　3.2PRD对STZ糖尿病大鼠血清胰岛素的影响实验组与对照组用药第4周后血清胰岛素检测。结果见表2。糖尿病大鼠血清胰岛素水平明显低于空白对照组，与空白对照组比较有显著性差异(Plt;0.01)，PRD和二甲双胍可增加血清胰岛含量，但无统计学意义。 　　3.3PRD对STZ糖尿病大鼠胰岛A、B细胞的影响 显微镜下观察，细胞胞质内充满黄褐色颗粒为阳性细胞，无黄褐色颗粒为阴性细胞。A细胞：空白对照组和实验组阳性细胞均位于胰岛周边，细胞胞质内含大量橘黄色颗粒，各组之间没有明显差距。B细胞：空白对照组胰岛内阳性细胞数量均多，遍布胰岛中央，阳性细胞胞质内含大量橘黄色颗粒;模型组胰岛内阳性细胞偶见，细胞体积较小，颗粒较少;二甲双胍组胰岛内阳性细胞较少，细胞大小不一，体积较大的细胞胞质内颗粒较多，体积较小的细胞胞质内颗粒较少，胰腺腺泡间偶见阳性细胞，体积较小，颗粒较少;PRD组阳性细胞散在于胰岛内，细胞体积较大，颗粒丰富，有些胰岛内阳性细胞数量明显增多，胰腺腺泡间有散在阳性细胞，胞体较大，颗粒较多。表1PRD对糖尿病大鼠空腹血糖的影响表2PRD对糖尿病大鼠血清胰岛素的影响 　 　4讨论 　　中医认为糖尿病(又称消渴病)的主要病理机制为：热盛伤津-气阴两伤-阴阳俱损。 现代 医学则认为2型糖尿病的机理主要是由于胰岛素分泌障碍或/和胰岛素抵抗。我们依据中医药理论确立糖尿