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芪归健脑颗粒对老年性痴呆大鼠学习记忆及脑组织nNOS、COX2蛋白表达的影响.doc
芪归健脑颗粒对老年性痴呆大鼠学习记忆及脑组织nNOS、COX2蛋白表达的影响 :姜波, 严妍, 吴娟,周忠光 【摘要】 目的: 观察芪归健脑颗粒对老年性痴呆(AD)大鼠学习记忆能力的保护作用,并探讨其作用机制。方法: ethods: Divided seven groups asculinity rats at random, and ten rats every team. Modeling AD rats pus injection. After seven days, qigui jiannao granule inistered to AD rats, and lasted tembering of AD rats, and used immunohistochemical method to detect the expression of COX2 and nNOS in hippocampus. Results: Qigui jiannao granule can obviously shorten the latency of AD rats caused by Aβ40 and increase the frequency of passing through platform. It decreased the masculine expression of COX2 and increased the masculine expression of nNOS. Conclusion: Qigui jiannao granule might lessen brain tissue neuron damage and improve the learning and remembering of AD rats caused by Aβ40 by signal transduction pather′s disease ;learning and remembering;nNOS;COX2 老年性痴呆又称阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD),是一种病因不明的原发性中枢神经系统进行性、退行性疾病,是老年人的多发病和常见病。本课题通过实验研究,初步探讨芪归健脑颗粒的药理作用机制,为防治老年性痴呆的临床应用提供佐证,也为今后的新药开发奠定基础。 1 材料与方法 1.1 实验动物与分组 12月龄orris水迷宫( 中国 医学 科学 院药物研究所)。 1.3 动物模型复制 水迷宫测试筛选48 h后, 参考 包新民等[1]《大鼠脑立体定位图谱》,给模型组大鼠的海马区缓慢注射已配好的Aβ40溶液2 μl(10 μg),缝合皮肤并消毒,防止感染。假手术组注入等量无菌双蒸水,正常组不作处理,其余各组同模型组。 1.4 给药方法 各组大鼠在造模后第7天开始口服灌胃给药治疗,2 ml/200 g大鼠,正常组、假手术组与模型组大鼠给予等容积生理盐水,每日1次,连续21天。 1.5 观察指标 1.5.1 定位航行实验 用于测量大鼠对水迷宫的学习能力。历时5天,从第1天起,每天分上、下午各训练1次。训练时随机选择一个入水点,将大鼠面向池壁放入水中,记录大鼠寻找并爬上平台所需时间(潜伏期),每次训练时间为60秒。 1.5.2 空间有哪些信誉好的足球投注网站实验 用于测量大鼠学会寻找平台后对平台空间位置记忆的能力,即在第6天撤除水下平台,随机选取一个入水点,在同一入水点将大鼠面向池壁放入水中,记录其在60秒内跨过原平台相应位置的次数和第一次通过平台的时间。 1.5.3 蛋白表达检测 按照 文献 [2,3]制备脑组织标本。免疫组织化学SP法检测脑组织中COX2,nNOS表达,免疫组化法按试剂盒说明书操作, 计算 观察区域内的免疫组化染色阳性细胞数。 1.6 统计学处理 各组数据以均数±标准差(±s)表示。多组均数间相互比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用q检验。两组间比较采用t检验。统计学处理用SPSS10.0统计软件包进行,Plt;0.05为差异有统计学意义。 2 结 果 2.1 芪归健脑颗粒对AD大鼠潜伏期的影响 术前各组大鼠潜伏期差异无统计学意义(Pgt;0.05)。术后第7天,正常组和假手术组的潜伏期与术前比较差异无统计学意义(Pgt;0.05);其余各组潜伏期较术前各组明显延长,大鼠发生了认知功能的下降,各治疗组与正常组和假手术组结果比较,差异有统计学意义(Plt;0.01)。 治疗后第28天,模型组与正常组比较,差异有统计学意义(Plt;0.01);正常组和假手术组的潜伏期与术前比较差异无统计学意义(Pgt;0.05)
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