旺拉嘎-3汤(Ⅱ方)中苦参碱及氧化苦参碱含量测定.doc

旺拉嘎-3汤(Ⅱ方)中苦参碱及氧化苦参碱含量测定摘要：目的：测定旺拉嘎－3汤中苦参碱、氧化苦参碱的含量；方法：比色测定法；结果：苦参碱含量为O.0126mg／g，RSD=1.11％；L4g苦参碱含量为0.0868mg／g，RSD=0.38％；结论：本方法简便快速，结果稳定，重现性好，回收率分别为96.98％、95.44％。 关键词：旺拉嘎3汤；苦参碱；氧化苦参碱；TLC－比色法 中图分类号：11284.2；R291.2 文献标识码：A　文章编号：1673－7717(2008)Ol－0040－02 旺拉嘎－3汤为蒙医传统方剂，由利得日、地格达、手掌参3味蒙药制成，用于治疗关节痛风，手、脚肿胀发热等症的制剂。为了保证制剂的质量，选其苦参中的苦参碱、氧化苦参碱为质量控制标准加以研究。有关苦参碱、氧化苦参碱在单味药中含量测定方法较多，而在复杂方剂中其测定报道并不多见。本文采用薄层层析比色法测定，结果满意。 1　材料与仪器 1.1　材料旺拉嘎3汤配伍由苦参、旺拉嘎、扁蕾组成，自制。生物碱(苦参碱、氧化苦参碱)对照品，由中国药品生物制品检验所提供。实验用化学试剂均为分析纯。 1.2　仪器设备Uv755B分光光度计，Uv―vis spectropho－tometer(上海分析仪器厂)。TG328B电光分析天平(福州－天平仪器厂)。 2　方法与结果 2.1　样品液的制备精密称取旺拉嘎3汤1g，分别加氯仿30mL，加浓氨试液0.3mL，放置24h，滤过。取滤液20mL(相当于成药0.667g)，蒸干，残渣用无水乙醇制成2mL溶液，备用。 2.2　标准液的制备精密称取生物碱(苦参碱、氧化苦参碱)对照品5.0mg，加无水乙醇2mL定容，加热使之溶解。摇匀(每毫升标准品2.5mg／mL)。 2.3　标准曲线的制备精密量取对照品10.O、20.0、30.O、40.0、50.O“L，分别置25mL量瓶中，加0.0125％的溴麝香草酚兰6mL，加氯仿6mL，充分振摇2min，移入分液漏斗中静置2h，分出氯仿层(黄色)，依分光光度法，在420nm波长处测定吸光度，以吸光度(A)为纵坐标，浓度C(L／mL)为横坐标，绘制标准曲线，计算回归议程。苦参碱议程为c=26.9542A+1.5148，R=O.9998。氧化苦参碱方程为C=39.06A－4.4375，R=O.9993，n=3。 2.4　样品含量测定分别精密称取样品液lmL，点在薄层板上，同时点苦参碱、氧化苦参碱对照品，以氯仿一甲醇一氨水(5：O.6：0.2)为展开剂，上行展开16―17cm挥干溶剂，碘显色。刮取苦参碱、氧化苦参碱斑点部位的硅胶置25mL容量瓶中，并刮取大小相同的空白硅胶做空白对照，分别加入pH为7.6的O.0125％的溴麝香草酚兰6mL，加氯仿6mL充分振摇2min，移入分液漏斗中静置2h，分别氯仿层(黄色)，以下按标准曲线项下操作。结果见表l。 2.5　精密度测定取氧化苦参碱对照品溶液2p,L点于硅胶G薄板上，重复5次按前法测其吸光度，±s为0.563±0.008，RSD为1.39％。 2.6　加样回收试验精密称取苦参碱、氧化苦参碱对照品适量于旺拉嘎一3汤中，测定苦参碱、氧化苦参碱的总量(步骤同样品)，计算回收率，结果见表2。 3　讨论 虽然在旺拉嘎3汤诸药中，含有多种生物碱及脂类等物质，经过提取点样，展开后，在紫外灯下观察。已分离。在被测物质附近干扰少，测定结果满意。 为了含量测定的准确，作了被测液稳定性试验，结果证明放置5h内测定结果不变。由于放置过程中溶剂挥发，故在测定时必须将氯仿补足到原来的重量，然后测定。 1