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临床血液检验中两种不同细菌鉴定法应用研究【摘要】 目的 探究直接药敏试验与常规药敏试验在临床血液细菌鉴定与检验中的临床应用价值。方法 对我院640例阳性血培养标本，分别给予直接法与常规法进行细菌鉴定和药敏试验对比。结果 两种检测方法的符合率为84.5%，亦无明显差异。结论 阳性血培养标本进行直接药敏试验，其检验结果不仅操作简便、时间短，而且检测结果准确，可广泛应用于细菌感染的临床血液检验。 【关键词】 血液检验；细菌鉴定；分析 由于现在部分人群滥用抗生素滥用，导致各种细菌耐药性和对抗生素的敏感性发生变异，为临床检验工作带来了一定的困难。在临床细菌检测上需采用合适的血液细菌鉴定法对患者血液样品进行检测，这样可有效提供临床疾病的诊断与治疗的准确性。我院640例患者的阳性血液样品进行鉴定与检测，进而探讨利用直接药敏试验法的临床血液细菌检测中的应用价值。1 资料与方法 1.1 一般资料 对我院2009年5月-2010年9月收治640例阳性血培养标本，所有患者均采用URITEST-3000型的生化血培养仪，行细菌鉴定时所使用的API鉴定板条。采用G+和G-的菌鉴定及药敏综合板、药敏纸片以及MH干粉，巧克力平板、麦康凯平板、分离用血平板，检测所使用的一次性无菌试纸以及10ml无菌针筒。 1.2 血液样品检测方法 本文患者的血液样品均采用直接药敏试验和常规药敏试验进行检测，同时分析不同检测方法所得出的细菌鉴定结果以及药敏结果的符合率。 1.2.1 直接药敏试验 直接药敏试验：首先需将血液样本接种于URITEST-3000型生化血培养仪中进行自动的培养和检测。在培养仪检测出阳性样后，迅速使用无菌注射器抽取阳性品(10mL)，并将其注入无菌试管中行密度梯度的离心分离细菌，所有阳性样均行1500r/min离心，在5min后将上层清液收集起来，然后再次在3000r/min下离心约15min后清除清液，使用PBS进行洗涤并沉淀两次后进行重悬［1］。另外在选取20μL的悬液涂片对阳性样行革兰氏染色，同时在倒置情况下进行显微镜观察：①若为一般菌种，将其接种2滴悬液于MH平板上(真菌例外)。采用无菌拭子将其均匀涂抹与平板上并贴上药敏纸片。判断阳性样中的敏感、耐药以及中度敏感可根据2005NCCLSI标准进行；②如果发现G+菌呈链状时，便可利用MH+5%的羊血血平板进行初级药敏试验。同时根据试验的结果来选择酶，另外将菌液的浓度调整为6.2×108cfu/L，之后将其接种于药敏综合板NC21上行细菌鉴定和药敏试验。 1.2.2 样品常规检测 常规检测：也就是将血液阳性样分别接种于血平板、巧克力平板和麦康凯平板上，并其置于35℃环境中进行16-28h的孵育，然后再将其行生长菌落涂片进行革兰染色镜检。之后在根据涂片的检验结果来选择合适的触酶或者氧化酶试验［2］，并按照URITEST-3000生物鉴定仪上的操作步骤上机对血液阳性样进行细菌鉴定和药敏试验。2 结 果 表1 两种检测方法抗生素敏感度检出符合率比较(%) 细菌种类 抗生素 直接法 常规法 符合率(%) G+杆菌 耐药 1098 1052 95.7 敏感 1238 1180 95.3 中度敏感 532 479 93.2 -球菌 耐药 792 785 99.3 敏感 478 460 95.4 中度敏感 130 120 89.5 对640例血液样品进行URITEST-3000型生化血培养仪检出的400例的阳性样，其中通过直接法鉴定出G+球菌252株，而G-球菌55株，而通过采用常规法鉴定出G+杆菌305株，G-球菌95株。两种检测方法的符合率为84.5%。对阳性样行药敏试验，其检测结果两种方法的总符合率均比较高，其中G+球菌和G-杆菌的耐药、敏感、中度敏感结果均无显著差异。3 讨 论 在最近几年的院内感染中，大部分都是由于患者受到多重耐药菌的感染进而诱发其全身感染或者败血症等细菌性疾病，其原因主要是由于患者的体内细菌耐药性的大幅度增加所致的。其将严重影响患者的疾病诊治以及生命质量。因而在临床上急需拥有快速、高效的临床检测方法来对细菌进行鉴定和耐药性测试，以此来指导临床用药。 直接法采用URITEST-3000型生化血培养仪检出阳性样中，然后对其含有的G-杆菌、G+球菌的药敏试验检测，其检测结果与常规方法检测结果相比，两组的总符合率均比较高，且两种方法检测结果差异无统计学意义，另外，采用此套检测系统其检测时间可缩短至10h，这与常规检测方法相比时间明显较短，其操作简便，因而直接法可替代常规药敏实验对G-杆菌和G+球菌的抗菌药物敏感度进行检测。这对于临床诊治败血症以及菌血症均具有重要的临床意义。 参考文献 ［1］ 李