3Y-TZP全瓷材料体外细胞毒性试验(MTT法).docVIP

3Y-TZP全瓷材料体外细胞毒性试验(MTT法)[摘要]目的：初步评价牙科全瓷材料3Y-TZP生物相容性。方法：根据ISO标准采用体外细胞毒实验（MTT法）测试不同浓度和浸提时间的材料浸提液L-929小鼠结缔组织成纤维细胞的影响从而对全瓷材料3Y-TZP的生物相容性进行初筛。结果：各浓度组OD值均与阴性对照无显著性差异（P0.05），与阳性组差异显著 (P0.01)，材料毒性级别0级。结论：两种材料体外细胞毒实验阴性，初步认为材料具有较好的生物相容性。 [关键词]3Y-TZP；生物相容性；体外细胞毒实验 [中图分类号]R783[文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2008）03-03 Preliminary evaluation on biocompatibility ofall-ceramic dental material:3Y-TZP LI Guo-hua1,GONG Zhen-yu1,YU Shu-xiang2,CHEN Ji-hua3 (1.Department of Stomatology, Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command, Fuzhou 350025,Fujian,China) Abstract: Objective To preliminarily evaluate the biocompatibility of 3Y-TZP which were used as a new dental all-ceramic materials. Methods According to ISO standards, in vitro cytotoxicity-test (MTT method) on L-929 cell were carried on. Results The OD-value of each test group were similar to the negative control and significantly different from positive control which indicated that the materials tested were safe to L-929 cells. Conclusion It is preliminarily estimated that 3Y-TZP is a safe material for dental clinical application. Key words：3Y-TZP;biocompatibility;vitro cytotoxicity-test(MTT method) 随着人们对审美要求的不断提高，越来越多的修复专业人士及患者乐于接受色泽逼真，无龈缘灰线的全瓷修复体。以往的全瓷材料因脆性大使其临床应用尤其是后牙桥、多单位长桥受到限制，氧化锆具有应力诱发相变增韧性能而被称为韧性陶瓷，是最有希望替代金属烤瓷的全瓷材料[1-2]。目前国内外的此类产品研究方兴未艾。良好的生物相容性是生物材料包含牙科材料得以应用的重要前提，也是保证临床安全的重要技术指标。因此针对这种材料的生物学评价是十分必要和重要的。本研究采用体外细胞毒性试验的方法检测该材料对细胞生长状况的影响，从而初步评价其生物相容性。 1材料和方法 1.1实验材料：3mol%氧化钇稳定的四方多晶氧化锆（3Y-TZP）全瓷材料试件；受试细胞株：小鼠结缔组织成纤维细胞（L-929细胞），ISO推荐；主要试剂与设备：①MTT：全称为3-（4，5-二甲基噻唑基-2）-2，5二苯基四氮唑溴盐（Sigma，USA）；实验前用PBS（0.01mol/L，pH值7.4）新鲜配制，0.22μm微孔滤菌器过滤除菌；②DMSO（西安化学试剂厂）：全称为二甲基亚砜；③DMEM培养液，10%小牛血清；④BioRAD Model-550酶联免疫酶标仪；⑤Heraus二氧化碳孵箱；⑥Olympus IX-70倒置相差显微镜。 1.2实验方法 1.2.1陶瓷材料浸渍液的制备：将实验材料所作试件打磨圆钝后，无水乙醇超声清洗20min，干燥后在121℃，33MPa压力下灭菌处理后放入无菌培养皿，加入10mlDMEM培养液（表面积与浸提液之比为1.5cm2/ml）后置于37℃培养箱中浸泡24h，制成浸提液。完成后用DMEM培养液分别稀释，制备100%、50%、25%、12.5%的浸提液，放入4℃冰箱保存。 1.2.2冻存L-929细胞复苏后经过两次传代，生长情况稳定。取对数生长期的受试细胞系，胰蛋白酶消化后制成单细胞悬液，调整细胞浓度约1