地龙冻干粉效价测定方法学.docVIP

地龙冻干粉效价测定方法学的验证 1、概述 为了符合2010年版GMP的要求，为了确保生产检验出符合预定治疗用途的产品，确保产品质量控制合格，保证用药的有效性，本报告针对地龙冻干粉效价测定方法学进行验证。 2、验证目的 建立地龙冻干粉效价的测定方法，确认该方法适合于该品种的效价检查。 3、适用范围 本标准适用于地龙冻干粉效价测定方法学的验证。 4、验证领导小组成员及职责 部门及职务 验证工作中职务 职责 公司副总经理 验证领导小组组长 负责领导验证工作，负责验证方案及报告的批准。 质监部经理 验证小组组长 负责协调领导验证工作，负责验证方案审核、验证报告的审核等各项工作。 QC主管 组员 验证方案、验证数据的审查、验证工作协调安排。 QC 组员 负责取样及提供验证所需检测数据。 QC 组员 负责收集各项验证、实验记录，并对试验结果进行分析。 QA 组员 验证过程监督检查，确保结果可靠性。 设备员 组员 负责仪器、设备、仪表、量具等的校正。 采购员 组员 负责试药、试剂、设备、对照品的购买。 5、验证进度计划 验证小组提出完整的验证计划，经批准后实施。 从 年 月 日至 年 月 日 6、相关文件 国家食品药品监督管理局标准（蚓激酶）；国家食品药品监督管理局标准WS3-361（Z-047）-2003（Z）；2010年版药典一部附录ⅩⅧA中药质量标准分析方法验证指导原则；实验室控制系统GMP实施指南第11章分析方法的验证和确认；药品生产验证指南第三篇第一章检验方法验证；药品生产质量管理规范（2010年修订）第四章第四节分析方法验证。 7、验证内容 7.1为了确保验证数据的准确可靠，采取以下几个先行保障措施 仪器：已经过校正并在有效期内 人员：均经过培训，熟悉方法及使用的仪器 对照品：均购自中国食品药品鉴定研究院 材料：所用材料，包括试剂、实验用容器等，均符合检验要求，不给实验带来污染、误差。 检查人： 日期： 确认人： 日期： 7.2验证方法 7.2.1效价测定方法 7.2.1.1试剂配制 ①磷酸盐缓冲液（PH7.8） 取磷酸氢二钠21.4g,氯化钠5.26g,加水900ml，用1mol/L盐酸调节PH值至7.8，再加水至1000ml。 ②（牛）纤维蛋白原溶液 取70u纤维蛋白原，加磷酸盐缓冲液（PH7.8）20ml，水浴微热使溶解。用时取20ml。 ③（牛）纤维蛋白溶酶原 取12u纤维蛋白溶酶原，加磷酸盐缓冲液（PH7.8）12ml使溶解，制成每1ml含1酪蛋白单位的溶液，用时取3ml。 ④(牛)凝血酶溶液 取70u凝血酶，加磷酸盐缓冲液（PH7.8）7ml使溶解，用时取3ml。 ⑤琼脂糖溶液 取琼脂糖330mg，加磷酸盐缓冲液（PH7.8）25ml，加热使溶后体积为20ml，置55℃水浴中恒温待用。 7.2.1.2纤维蛋白板的制作 将②、⑤、③、④按顺序依次加入混匀，迅速倒入水平放置的平皿（8.5cm×23.5cm）中，若有气泡，可在未凝固之前，用小钢铲将气泡赶走，待其凝固后，盖上盖，放4℃冰箱保存1小时后，取出，此板即为标准纤维蛋白板。 7.2.1.3检测 取地龙冻干粉约10mg，加水制成每1ml含1mg的溶液作为供试品溶液。取蚓激酶标准品，制成浓度分别为每1ml中含10000和8000蚓激酶单位的溶液。用直径约为3mm的不锈钢小管，在纤维蛋白板上打若干个小孔，精密量取蚓激酶标准品溶液和供试品溶液10μl，分别点在小孔中，将板水平放入37℃恒温箱中保温18个小时后，取出，测得各溶圈直径并计算出溶圈面积。以蚓激酶标准品单位数与溶圈面积的比值为计算系数，乘以供试品的溶圈面积，计算供试品效价单位数。标准品与供试品应各作两点，以平均值计算。 7.2.2耐用性试验 7.2.2.1不同琼脂糖对试验结果的影响 按照效价测定方法测定 ， 批地龙冻干粉的效价，分别用2个批号的琼脂糖铺板。 可接受标准 干扰较小 b、验证实施记录和结论 表1 不同琼脂糖的检测结果 琼脂糖批号 样品 效价（u） 样品 效价（u） 结论： 检验人： 日期： 复核人： 日期： 7.2.2.2不同纤维蛋白溶酶原对试验结果的影响 按照效价测定方法测定 ， 批地龙冻干粉的效价，分别用2个批号的纤维蛋白原。 a、可接受标准 干扰较小 b、验证实施记录和结论 表2 不同纤维蛋白原的检测结果 纤维蛋白溶酶原批号 样品 效价（u） 样品 效价（u）