人淋巴细胞分离液（低内毒素）.PDFVIP

Toll Free: 400 6721 600 (China Only) Website: 人淋巴细胞分离液(低内毒素) I. 产品信息 目录号: HLSM 1077LE 规 格: 200ml 保 存: 未启封前室温避光保存，切勿冷藏或冻存；启封后2 - 8℃避光保存 比 重: 1.077±0.001 g/ml pH 值: 7.0 - 7.5 内毒素: ≤ 0.06 EU/ml 渗透压: 280 - 340 m0smol/kg 效 期: 两年 II. 产品简介 外周血单个核细胞 (peripheral blood mononuclear cell, PBMC)是指外周血中具有单个核的细胞，包含淋巴 细胞、单核细胞、树突状细胞和其它少量细胞(造血干细胞等) 。PBMC 是免疫学功能研究中最常用的细胞模 型，如细胞增殖、细胞毒性、细胞因子分泌等。外周血中各种血细胞的密度不尽相同，利用淋巴细胞分离 液作密度梯度离心，使一定比重的细胞群按相应密度梯度分布，从而将血细胞进行分离。血浆和血小板的 密度较低，位于分离液的上部；红细胞和粒细胞密度较大，沉于分离液的底部；PBMC 密度接近于分离液， 位于分离液层，这样就可获得PBMC 。 本品为带有乳光或微乳光的灭菌水溶液，主要成分是葡聚糖和泛影葡胺，适用于从人外周血血、骨髓和 脐带血中分离有核细胞 (包括淋巴细胞) 。 III.使用方法 以下方法适用于从外周血中分离人淋巴细胞。如从骨髓、脐带血中分离，需要先去除红细胞后再 进行以下步骤分离人淋巴细胞。 1. 将淋巴细胞分离液取出回复至室温。 2. 无菌条件下，取2 ml 淋巴细胞分离液加入到合适的离心管中。取1 ml 抗凝血，与等量合适的缓冲液如 Hank’s液或不含Ca2+和Mg2+ 的PBS 或生理盐水混匀，小心加到淋巴细胞分离液液面上方。注意不要破 坏淋巴细胞分离液与抗凝血的界面。 3. 室温下，1200 - 1500 rpm 水平离心20 - 30 分钟 (具体离心条件可能因仪器不同而有所差异) 。 4. 小心取出离心管，此时离心管中由上至下分成四层。第一层为血浆或组织匀浆液层。第二层为环状乳 白色淋巴细胞层或单核细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。小心吸取第二层的细胞， 转移至含4 - 5 ml 合适的缓冲液如Hank ’s液或不含Ca2+和Mg2+ 的PBS 或生理盐水的离心管中，充分混 匀后，以1500 - 2000 rpm 离心10 分钟。沉淀经反复洗涤2 次即得所需细胞。 IV. 样本要求  骨髓、脐带血、外周血要求新鲜，避免冷冻  骨髓、脐带血、外周血采集时必须加抗凝剂。推荐使用枸椽酸钠，每100 ml 脐带血加入 10 ml 2.2 %枸 椽酸钠。没有枸椽酸钠时，也可以用肝素代替，每 100 ml 脐带血用1/2 支肝素 (12500 单位包装) ，每支 肝素用注射用生理盐水稀释至10 ml 。 Product For Research Use Only rev: 05/17 MultiSciences Biotech Co,. Ltd Technical Service: tech@ To place an order: service@ Toll Free: 400 6721 600 (China Only) Website: V. 注意事项 1. 请在使用本产品前仔细阅读说明书。本产品仅用于科研，不可用于诊断。 2. 为了您的安全和健康，请穿戴实验防护服、手套、口罩等必要的防护装备。 3. 本产品属于光敏性，在运输和保存过程中应注意避光。 4. 由于各品牌离心机的性能不同，南北地区温度环境和四季的差异，可能影响分离效果，用户可以调整离 心转速和时间，摸索最佳的分离条件。 5. 稀释后的样本有助于提高有核细胞得率，将稀释的血液叠加于人淋巴细胞分离液上时，一定要细心，动 作要轻，避免冲散分离液面或与分离液混合而影响分离结果。 6. 吸取细胞时，应避免吸出