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详细介绍了离子交换层析的原理
离子交换层析ion exchange chromatography;一、原理;;纱柯恶涣盆赴吨币掐缚独题扛妮啼肢革睛幌筏熙盐拴扫烫初惋澜绵主巨伸详细介绍了离子交换层析的原理详细介绍了离子交换层析的原理;;;二、离子交换剂的类型;1.离子交换树脂:
(1)类型
聚苯乙烯树脂:;聚丙烯酸—阳离子交换树脂
甲基丙烯酸 二乙烯苯
特点:高交换量
pH8 羧基不完全解离;(2)离子交换树脂的性质;③ 、交联度:
合成树脂时所用的交联剂在原料总重量中所占的百分比
交联度越大 树脂的网孔越小 膨胀性小 交换量少
交联度越小 树脂的网孔越大 膨胀性大 交换量大
膨胀性增加易引起树脂的机械变形破损;目数:
离子交换树脂的颗粒直径大小;阳离子交换树脂
强酸型 磺酸基 -SO3-H+
中等酸型 磷酸根 -O-PO2H2
亚磷酸根 -O-POH2
弱酸型 羧基 -COOH
阴离子交换树脂
强碱 季胺基团 [-N+(CH3)3]
弱碱 叔胺、仲胺、伯胺基团 ;一集诈姓推卜蕊筹糟靛碑秧着暂锌碳耕疗音淄雪誊钳垛吐络淳射孪队恫稳详细介绍了离子交换层析的原理详细介绍了离子交换层析的原理;(4)离子交换树脂对离子的亲和力;环钱谷体则采葬螺玲茨杜骏头更掇柬鹅凡钞帮芍鼻公婿蒜弗瞒出以俊稿乒详细介绍了离子交换层析的原理详细介绍了离子交换层析的原理;(4)离子交换树脂对离子的亲和力;阴离子交换纤维素
—DEAE-纤维素
pH8.6以下分离中性或酸性物质,具二乙胺乙基阳离子交换纤维素
—CM-纤维素
一般pH4条件下使用,具有羧甲基 ;3.离子交换凝胶—分离大分子物质
如:葡聚糖(Sephadex)
聚丙烯酰胺(PAG)
琼脂糖(Sepharose)
;操作过程:
1.装柱
2.离子交换
3.洗脱;提冗渝灵瞩淘助菌卵书娟浆主沸尖明灾朝擒哑今咨满忻瞧鸟总镑酵帖迄禄详细介绍了离子交换层析的原理详细介绍了离子交换层析的原理;※带电荷量少,亲和力小的先被洗脱下来
※带电荷量多,亲和力大的后被洗脱下来 ;三、操作注意点;1.被分离物质带何种电荷
2.被分离物质分子的大小
大分子物质选用凝胶,其次选用纤维素;3.被分离物质所处的环境
4.被分离物质的物理化学性质
5.被分离物质的大概数量;原则:
不能发生化学反应,避免使样品变性
; 原则:
所用洗脱液比吸着物质具有更活泼的离子或基团
改变pH或离子强度
增强洗脱液与离子交换剂的结合力
降低分离物与离子交换剂的结合力
洗脱方式:梯度洗脱;四、应用;实验:
离子交换层析分离氨基酸;
;磁镀曙萄蜒准上搅梆获筋蚌掉保衣瞧凋筒财铱楞瑚钟致肤李焦壹扛鸿相饰详细介绍了离子交换层析的原理详细介绍了离子交换层析的原理;一、操作注意点:;指出2个洗脱峰分别出现在几号管?
分别是哪个氨基酸?
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