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第3章中等组成和配方

*;*; 在离体培养条件下,不同种植物的组织对营养有不同的要求,甚至同一种植物不同部位的组织对营养的要求也不相同,只有满足了它们各自的特殊要求,它们才能很好地生长。因此,没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官。 ; 在建立一项新的培养系统时,首先必须找到一合适的培养基,培养才有可能成功。在植物组织培养历史进程中,事实上也紧密地伴随着培养基的研制史。 ;*;*; 1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。 特点:无机盐离子 浓度高,硝酸盐含量较高 广泛用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养; 1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计的。 特点: 含有较低的铵,这可能对不少培养物的生长有抑 制作用。 双子叶植物 尤其木本植物组培可选择; 1937年由White为培养番茄根尖而设计的,1943年 随其专著的出版而问世。1963年又作了改良,称作White改良培养基,提高了MgSO4的浓度和增加了硼素。 ;1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的; 特点:有机成分较复杂,它包括了所有的单糖和维生素 广泛用于原生质体培养,包括融合的培养;*;*; 水是植物原生质体的组成成分,也是一切代谢过程的介质和溶媒。它是生命活动过程中不可缺少的物质。 配制培养基母液时要用蒸馏水,以保持母液及培养基成分的精确性,防止储藏过程发霉变质。大规模生产时可用自来水。但在少量研究上尽量用蒸馏水,以防成分的变化引起不良效果。; 无机营养成分就是人们平常所说的矿物质、无机盐或无机元素。它们在植物生活中具有非常重要的作用。 如氮(N)、硫(S)、磷(P)是蛋白质、氨基酸、核酸和许多生物催化剂即酶的主要或重要组分。它们与蛋白质、氨基酸、核酸和酶的结构、功能、活性等有直接的不可缺少的关系。 ; 根据植物对这些元素需要量的不同或者根据目前植物培养基中添加的这些元素量的大小,可将它们分成大量元素和微量元素。 大量元素:一般指在培养基中的浓度大于0.5mmol/L的元素(或﹥100mg/L)。主要包括氮、磷、钾、钙、镁和硫六种。 微???元素 : 指小于0.5mmol/L的元素或﹤100mg/L)。;大量元素(以Ms培养基为例);微量元素(以MS培养基为例);1.大量元素;(2) P 是磷脂的主要成分,而磷脂又是原生质、细胞核的重要组成部分。磷也是ATP、ADP等的组成成分。 在植物组织培养过程中,向培养基内添加磷,不仅增加养分、提供能量,而且也促进对N的吸收,增加蛋白质在植物体中的积累。 常用的物质有KH2P04或NaH2P04等。 缺磷或钾时细胞会过度生长,愈伤组织表现出极其蓬松状态。; (3) K 对碳水化合物合成、转移、以及氮素代谢等有密切关系。 K增加时,蛋白质合成增加,维管束、纤维组织发达,对胚的分化有促进作用。但浓度不易过大,一般为1-3mg/L为好。 制备培养基时,常以KCl、KNO3等盐类形式提供。;(4) Mg、S和Ca Mg 是叶绿素的组成成分,又是激酶的活化剂; S是含S氨基酸和蛋白质的组成成分。 常以MgS04·7H20提供, 用量为1-3mg/L较为适宜; Ca是构成细胞壁的一种成分,Ca对细胞分裂、保护质 膜不受破坏有显著作用 常以CaCl2·2H20提供,缺硫时培养的植物组织会明显的退绿。 ;2.微量元素; B,Mn,Zn,Cu,Mo,Co等,也是植物组织培养中不可缺少的元素,缺少这些物质会导致生长,发育异常现象。 Mn对糖酵解中的某些酶有活化作用,是三羧酸循环中某些酶和硝酸还原酶的活化剂。 B 能促进糖的过膜运输,影响植物的有性生殖如花器官的发育和受精作用。B还具有抑制有毒的酚类化合物的形成的作用,改善某些植物组织的培养状况,缺硼时细胞分裂停滞,愈伤表现出老化现象。;Zn 是吲哚乙酸生物合成必需的,也是谷氨酸脱氢酶、乙醇脱氢酶等的活化剂。 Cu 是细胞色素氧化酶、多酚氧化酶等氧化酶的成分,可影响氧化还原过程。 Mo 是硝酸还原酶和钼铁蛋白的金属成分。;有 机 营 养 成 分;氨基酸和有机附加物(以MS培养基为例); 选用种类:蔗糖(或葡萄糖、果糖)等 蔗糖浓度:2-3%,胚培养为4-15% 高压灭菌部分糖会分解;大生产时可用绵白糖 不同糖类对生长的影响不同。从各种糖对水稻根培养的影响来看,以葡萄糖效果最好,果糖和蔗糖相当,麦芽糖差一些

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