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vectorNTI使用教程

Vector NTI Suite使用简介Vector NTI Suite 是一套功能强大、界面美观而又友好的分子生物学应用软件包。它主要包括四个组件,分别对DNA、RNA 和蛋白质进行各种分析和操作。一、Vector NTI作为Vector NTI Suite 的核心组成部分,它可以在各种分子生物学研究项目的全过程中提供数据组织、编辑和分析支持。(一)对分子序列的操作我们以一个DNA 序列为例,进行一系列的常规分析;最后将此DNA 序列翻译成氨基酸序列,并对此氨基酸序列进行各种分析。A,DNA 序列为猪生长激素的cDNA序列,长为761bp。首先使用Vector NTI 的Create New 命令将此序列导入到Vector NTI 的数据库中:1,第一种方法:如果只知道序列时,点击Molecule 才菜单中的Create New——UsingSequence Editor(DNA/RNA……);2,在出现的“New DNA/RNA Molecule”对话框中,首先在General 填入导入序列的名称——PGH;3,在DNA/RNA Molecule 活页中,选中Linear DNA, Animal/other Eukaryotes,RepliconType 中选Chromosome;4,Description 中填入:S.Scrofa Growth hormone mRNA;5,在Sequence and Maps 中点击“Edit Sequence”按钮,将DNA 序列复制后,点“Paste”按钮-点“OK”-确认后就可以完成序列导入。B,如果是一个从GenBank上下载的序列文件,则:点击 “Molecule” 菜单-Open-Moleculefiles 命令,找到序列文件,在File format 中选中GenBank Files;点击OK。(二)常规操作:当序列导入完成后,在桌面出现三个窗口,上左侧的窗口中显示的是该序列的常规信息,上右侧窗口则以图形的格式展示序列的特征区及酶切图谱等。下面一个窗口显示的是序列:默认状态下以双链形式出现,也可以更改为单链显示。1.选择序列区域:在图形区域或序列区域直接拖动鼠标左键,同时在最下端的状态栏中显示出所选区域的范围。2.删除:选中后直接点击键盘上的Delete 键,确认后即可删除。3.选中序列片段后,点击Edit 菜单,用其中的命令可以完成对此片段的剪切、复制、删除、定义为新的特征区和用其它序列来代替等。4.当点在其一特定位置时,我们也可以在此位置插入新的序列:Edit – New – InsertSequence as 5.当希望序列显示单链时,点击View – Show Both Strands(三)常规分析:1.设计PCR Sequence Primer, Hybridization, Probes:选中设计引物的模板区或点击Analyze 中的相应命令即可。需要注意的是,在设计前,首先得将序列存入数据库中,具体设计由于我们推荐使用Oligo,所以此处不详述。2.序列基本信息分析:选中序列区段后,选Analyze –Oligo Analysis, 在Oligo Analysis 对话框中,点击Analyze 按钮,即可得到分子量、GC 含量、Tm 值、3‘端的自由能、回文结构及重复序列等基本信息。3.酶切图谱分析点击Analyze 菜单中Restriction Sites 命令,出现“Restriction Map Setup”对话框,点击Add按钮,填入需要分析的位点,不需要的位点夜可以选中后点Remove 按钮移除。为了显示正确,我们可以设定超过一定位点数量的酶不显示,可以限定分析的区域等。点击OK 后程序自动完成酶切分析。4.Motif 查找点击Analyze 菜单中的Motifs 命令,在出现的Motifs Setup 对话框中我们可以添加新的Oligo或从Oligo Database 和Oligo List 中选取;选中后点击OK 按钮,程序完成Motif 的查找,同时给出相似性的百分比。5.ORF 查找点击Analyze 菜单中的ORF 命令,在出现的ORF Setup 对话框中,填入ORF 的最小长度(多少个密码子)以及其它一些设定后点击OK,程序自动完成ORF 的查找。6.翻译翻译前选中一个ORF 或一个区域,这里我们希望把pGHcDNA基因完全翻译成蛋白质,因此选中最长的一个ORF(7-657bp)。点击Analyze 菜单中的Translate 命令中的“Into NewProtein”-“Direct Strand”,在出现的“New Protein Molecule”对话框中给出新蛋白质的名称后点击确定,程序完成翻译并打开一个新的窗口,显示氨基酸

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