试验四植物呼吸速率的测定.PPTVIP

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试验四植物呼吸速率的测定

2. 称取10g不同萌发阶段的种子,以纱布包裹,悬挂在橡皮塞下方; 3. 向两瓶内各加入Ba(OH)2溶液20mL,立即封口,室温放置。 植物生物学实验(二) 植物生理学基础与综合实验 南京师范大学生命科学学院 实验五、植物呼吸速率 的测定——小篮子法 一、实验目的与要求 掌握小篮子法测定植物种子呼吸速率的原理与步骤; 比较不同萌发阶段绿豆种子的呼吸速率。 二、实验原理 1、植物的呼吸作用 定义:是植物体吸收氧气,将有机物转化成二氧化碳和水并释放能量的过程。 葡萄糖+6O2 6CO2 +6H2O+能量 意义: 代谢的中心 有机物转化的枢纽 能量的主要供应渠道 2、测定呼吸速率的常用方法 红外线CO2气体分析仪(IRGA) CO2可以吸收特定波段的红外辐射。当被检CO2气体通过IRGA的气室时,可使红外辐射减少或增加,且变化幅度取决于CO2的浓度。这种变化可被IRGA的检测器所检定,且以电讯号的形式输出,由记录仪所记录。 氧电极法 3、小篮子法 密闭容器中加入一定量碱液[一般用Ba(OH)2],并悬挂植物材料,则植物材料呼吸放出的CO2可为容器中Ba(OH)2所吸收,然后用草酸滴定剩余的Ba(OH)2,从空白和样品二者消耗的草酸溶液之差,可计算出呼吸释放的CO2量, 具体反应式: Ba(OH)2+CO2 BaCO3 +H2O Ba(OH)2+H2C2O4 BaC2O4 +2H2O 以酚酞指示滴定终点。 1mL的1/44mol/L草酸溶液中的草酸与1mg的CO2等摩尔数。 空白和样品二者消耗的草酸溶液的mL数差值 = Ba(OH)2溶液吸收的CO2 mg数 = 种子呼吸作用释放的CO2 mg数 三、实验材料与试剂 材料 浸种和催芽不同时间的小麦或绿豆种子; 试剂 0.05mol/L的Ba(OH)2; 1/44mol/L的草酸; 酚酞指示剂。 1# 种子 2# 实验装置图 四、实验步骤 取具玻璃塞和橡皮塞的500mL广口瓶各1只,分别编号1#、2#; 1# 种子 2# 实验装置图 不时轻摇两瓶,1h后,拔除瓶塞,各加酚酞指示剂2滴,立即以塑料袋分别封口; 将滴定管下端插入瓶中,以草酸滴定Ba(OH)2,记录所用草酸体积V1和V2。 五、计算 呼吸速率(mgCO2/gFW.h) =(V1-V2)/(W× t) 六、思考题 在本实验呼吸测定怎样排除不应有的干扰因素? 在实验过程中为什么要轻摇广口瓶数次? 就计算公式而言,为什么草酸的用量可代表种子呼吸放出的CO2的量? 草酸(1/44 mol/L)滴定Ba(OH)2 (0.05 mol/L),酚酞作指示剂,溶液由紫色变成无色,滴定至终点后,马上颜色又由无色变成紫色,原因是什么? 白天在实验室测定植物茎叶的呼吸速率会受到什么影响?如何解决? 如果实验材料选择的是不同萌发阶段的小麦种子及幼芽,哪一阶段的呼吸速率最大? * 25℃下以自来水浸泡。

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