丹参素涂层β-磷酸三钙支架材料的制备与细胞相容性.docVIP

丹参素涂层β-磷酸三钙支架材料的制备与细胞相容性 吴 涛1，刘英超1，南开辉2，舒 涛3，吴金辉1，卢志勤1，邢建洲1，吕 军1 (1广州医科大学附属武警广东省总队医院急诊科，广东省广州市 510507；2温州医科大学附属眼视光医院，温州市生物材料工程技术研究中心，浙江省温州市 325027； 3中山大学附属第三医院脊柱外科，广东省广州市 510630) 引用本文：吴涛，刘英超，南开辉，舒涛，吴金辉，卢志勤，邢建洲，吕军. 丹参素涂层β-磷酸三钙支架材料的制备与细胞相容性[J].中国组织工程研究，2017，21():2247-2253. DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.14.019 ORCID: 0000-0002-9081-6008(吕军) 文章快速阅读： 文题释义： 丹参素涂层β磷酸三钙支架：β-磷酸三钙骨支架材料，从扫描电镜结果来看，随着丹参素载药剂量的增加，β-磷酸三钙材料表面的结晶成分密度逐渐增加，当丹参素增至10-5 mol，β-磷酸三钙材料表面的结晶成分达到致密状态。红外光谱分析表明，负压吸附法构建丹参素涂层β-磷酸三钙支架材料过程中，两种材料未发生化学性质上的改变，能够较好地保留丹参素的药理活性。 载细胞组织工程骨植入体内后的“血管再生”难题：因为活体组织毛细血管供氧范围仅为100-150 μm，当生物材料较大时，内部氧供和营养的缺乏会导致种子细胞大量死亡；且当材料与血液接触时，会因补体活化和凝血级联反应形成血栓，阻碍氧和营养物质的渗透。为解决这一问题，研究者采用在预制材料内植入血管、带血管组织瓣包裹材料等方法进行了处理，但生物材料的血管再生过程仍需数周时间，依然无法解决与细胞耐受缺氧仅数小时之间的矛盾。生长因子生物材料模式的组织工程骨固然规避了血管再生问题，但生长因子在体内半衰期短、容易失活、易于弥散。 功能，发挥血管保护作用。 目的：制备丹参素涂层β磷酸三钙支架材料，观察其细胞相容性。 方法：采用负压吸附法构建载药剂量分别为10-7，10-6，10-5 mol的丹参素涂层β磷酸三钙支架材料，采用扫描电镜观察材料表面丹参素涂层分布，采用红外光谱分析材料内部成分。分别以β磷酸三钙支架材料浸提液与不同载药量丹参素涂层β磷酸三钙支架材料浸提液培养人血管内皮祖细胞，培养2，4，6，8，10 d，检测细胞增殖；培养1，7，14 d，检测细胞上清液中NO和血管内皮生长因子水平；培养14 d，观察细胞在血管基质胶上的管腔形成。将人血管内皮祖细胞接种于β磷酸三钙支架与不同载药量丹参素涂层β磷酸三钙支架上，培养7 d，扫描电镜观察细胞生长。 结果与结论：①丹参素涂层均匀一致地平铺于材料孔隙内表面，随载药剂量增加，丹参素涂层的结晶结构呈现出更加致密状态；②丹参素涂层β磷酸三钙支架中丹参素和磷酸三钙的红外光谱特征吸收峰位置均未发生变化；③丹参素涂层β磷酸三钙支架对人血管内皮祖细胞具有促增殖作用，以10-6，10-5 mol丹参素涂层β磷酸三钙支架为有效；④与β磷酸三钙比较，10-6，10-5 mol丹参素涂层β磷酸三钙支架可在第14 天显著提高细胞上清液中NO水平P 0.05)，在第7，14 d显著提高细胞上清液中血管内皮生长因子水平P 0.05)；⑤不同载药量丹参素涂层β磷酸三钙支架组浸提液培养细胞均有形成管腔结构趋势，以10-5 mol丹参素涂层β磷酸三钙支架组形成的管腔结构最为成熟；⑥结果表明，丹参素涂层ββ-磷酸三钙；丹参素；血管内皮祖细胞；细胞相容性；支架材料；国家自然科学基金 主题词： 磷酸钙类；内皮细胞；组织工程 基金资助： 国家自然科学基金；广东省自然科学基金(S2012040006295)；广东省医学科研基金(A2012499，A2014499)  缩略语： 血管内皮祖细胞：endothelial progenitor cells，EPCs Preparation and cytocompatibility of beta-calcium phosphate scaffolds with tanshinol coating Wu Tao1, Liu Ying-chao1, Nan Kai-hui2, Shu Tao3, Wu Jin-hui1, Lu Zhi-qin1, Xing Jian-zhou1, Lv Jun1 (1Department of Emergency, Guangdong General Hospital of Chinese People’s Armed Police Force, Guangzhou Medical University, Guangzhou 510507, Guangdong P