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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 教学目标 利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。 3 、土壤微生物主要分布在距地表 cm的近 性土壤中，约 为细菌。 4、分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是 ，其目的是保证获得 的平板。细菌稀释度为 ，放线菌稀释度为 ，真菌稀释度为 。 5、 培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在 ℃培养1～2d，放线菌一般在 ℃培养5～7d，霉菌一般在 ℃的温度下培养3～4d。 6、在菌落计数时，每隔 h统计一次菌落数目。选取 时的记录作为结果，以防止因 而导致遗漏菌落的数目。 点评：菌种中有些菌体增殖快，有些菌体增值慢，所以培养时间要充足，使得每个菌体都能形成肉眼可观察到的菌落。 7、菌落的特征包括 等方面。 〖思考7〗土壤微生物种类最多、数量最大的原因是什么？ 土壤中营养物质含量丰富，环境条件适宜等。 8、 实验过程 1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要 。 2）应在 旁称取土壤 g。将称好的土样倒入盛有 mL无菌水的 中，塞好棉塞。 3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在 旁进行。 4）实验时要对 作好标记。注明 等。 5）为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当 。 〖思考8〗在研究未知微生物时务必规范操作，以防被 感染，实验后一定要洗手。 3．结果分析与评价 1、对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助 的方法。 2、在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的 将尿素分解成了 。氨会使培养基的碱性 ，PH 。因此，我们可以通过检测培养基 变化来判断该化学反应是否发生。 3、在以 为唯一氮源的培养基中加入 指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变 ，说明该细菌能够 。 〖思考9〗测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到 培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现 ，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。你认为在该实验中至少应取 个水样。 （三）课堂总结、点评 预习自测 1、下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 ( ) A．KH2PO、Na2HP0、MgS04·7H2、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B．KH2PO、Na2HP0、MgS04·7H2、葡萄琼脂、水 C．KH2PO、Na2HP0、MgS04·7H2、尿素、琼脂、水 D．KH2PO、Na2HP0、MgS04·7H2、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水；106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为01mL) ( ) A．234×108 B．234×109 C．234 D．234 3、在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有( ) ①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误④没有对照 A．①②③ B．②③④C．①③④ D．①②④关于土壤取样的叙述错误的是( ) A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤 B．先铲去表层土3cm再取样 C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤下列操作步骤正确的( ) ①土壤取样 ②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中 ③吸取01mL进行平板101、102、103、104、105、106、107稀释度 A．①→②→③→④ B．①→③→②→④C．①→②→④→③ D．①→④→②→③关于测定土壤中细菌数量叙述，正确是( ) A．一般选用103～107倍的稀液分别涂布 B．测定放线菌的数量，一般选用103、lO 4和105倍稀释 C．测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释