色谱应用与化合物提纯.ppt

TLC方法建立 一、展开剂体系（三大体系） 1、正己烷－乙酸乙酯（H-EtOAc） 2、二氯甲烷－甲醇(DCM-MeOH) 3、其他溶剂或混合溶剂 二、显色方法 1、UV显色方法 2、显色剂显色方法 3、碘蒸汽熏法显色 三、载体分离物质：硅胶、氧化铝、聚酰胺等 TLC方法建立（Rf要求） 举例物质中可能含有的杂质 1、碳链长短带来的杂质; 2、含氟多少带来的杂质 3、氧化杂质（反应方程式如下） TLC方法建立--- 甲氟奎 常见问题解决 拖尾问题: 由于载体对被分离物 质吸附太强所致.解决办法是: 对硷性化合物,在展开剂中添加 比其极性强的不干扰测定的硷性物. 如氨水、三乙胺等，置换解决。 对酸性化合物，在展开剂中添 加比其极性强的不干扰测定的酸性 物.如甲酸、冰乙酸等，置换解决, 举例见幻灯片5. 边沿效应问题：特别是对铝泊 板，可用食指与拇指沿边沿上下抚 平整后，先空白爬行一次看是否有 边沿效应，无则热风吹干后使用。 TLC方法建立---甲氟奎 Synthetic process (1):过渡物 (2):产品 TLC方法建立及其验证 某药物-中间体监控TLC方法建立 中间体1检测TLC方法建立 分离试验:△Rf=0.10 满足 分离要求. 检测限试验:中间体1为3.00μg, SM为 2.02μg. 加样试验:SM取检测限的2-3 倍(最少),中间体1取SM量的50-60 倍,然后混合. SM:中间体1=4.69:250 某药物-中间体监控TLC方法建立 中间体结构式 中间体2 中间体3 中间体4 极性:中间体4＞3＞2 薄层原位化学反应简介 一、创立时间：1953年由Miller及Kirchner提出 二、原始发表文章：Miller M. Kirchner J G. Analchem，1953 三、定义：根据不同的目的在点样处点加试剂或以其他方式使 被测物质在点样原位处进行化学反应，当反应完成后再进行展开，从而测定反应进行情况。 四、研究内容：氧化还原、光解、水解、脱水、卤化、酯化、硝化、重氮化等反应以及制备衍生物都可以用此方法进行。 薄层原位化学反应的应用 药物稳定性研究 化学反应摸索 化学鉴别反应 应用举例硝苯地平对光稳定性研究 硝苯地平对光的稳定性 硝苯地平的氧化反应 硝苯地平氧化反应TLC检测 脱水反应举例尼群地平中间体制备 TLC方法演示 双异丙酚的氧化 纯品双异丙酚是无色液体，在TLC板上展开时如不显色则看不出，但在点样原点处将其用氧化剂氧化后生成了玫瑰红色的醌类物质，展开时可见红色斑点在上行。 利用色谱分析图构思分离方法 利用GC谱图研究蒸馏、精馏过程 HPLC谱图与重结晶、吸附工艺关系 举例说明 利用GC谱图研究蒸馏、精馏过程 组分出峰顺序及其依据 一、 对一般常用的毛细管气相色谱柱和填充柱来说：各被测定组分主要按照由低到高的沸点顺序、由小（大）到大（小）的极性顺序依次出峰。 二、a.程序升温情况下，各组分按照由低到高的沸点顺序 依次出峰。 b.沸点相近的组分，如使用极性柱分离，则按照由小到大的极性顺序依次出峰；反之相反。 应用举例 利用GC谱图研究蒸馏、精馏过程 应用举例(程序升温) 1、氟苯、氯苯、溴苯的分离 沸点顺序：氟苯＜氯苯＜溴苯 GC谱图 利用GC谱图研究蒸馏、精馏过程 2、沸点相近组分的分离 a.组分A与B 利用GC谱图研究蒸馏、精馏过程 2、沸点相近组分的分离 b.组分A与B分离色谱图（A极性大于B） GC图谱与蒸馏、精馏的关系未知沸点的液体组分分离（程序升温情况下） 当保留时间差（ΔRT）很大时，可直接用蒸馏的方法分离。 当保留时间差较小时，只能考虑用精馏的方法分离 或分子蒸馏技术。 一条经验：当在HP6890型GC上安装30M毛细管柱，且当载气流速为1.6ML/min时，如Δ RT≥1min，则可以用精馏的方法提纯组分，理论塔板数一般小于50；如 ΔRT＜0.5min，则较难用精馏的方法提纯。