免疫学防治与诊断课件.pptVIP

间接荧光法：用一抗与标本中的抗原结合，再用荧光素标记的二抗染色。该法的优点是敏感性比直接法高，制备一种荧光素标记的二抗可用于多种抗原的检测，但非特异性荧光亦会增加。 补体结合荧光免疫法：此法是在间接法的第一步抗原—抗体反应时加入补体，使之与抗原——抗体复合物结合；再用荧光素标记的抗C3抗体进行示踪。 (RIA) 是用放射性核素标记抗原进行的免疫学检测技术。它将放射性核素显示的高灵敏性和抗原抗体反应的特异性结合，使检测的敏感性达pg水平。常用于标记的放射性核素有I125和I131。 常用于胰岛素、生长激素、药物等微量物质的测定。 Ag* Ab Ag 标记抗原 特异性抗体 待测抗原 ( Ag*-Ab)+ (Ag-Ab) 抗原抗体复合物 分离Ag*-Ab 和游离Ag* 从标准曲线上读知含量 测定Ag*-Ab和/或游离Ag*放射性 放射免疫测定法(RIA)示意图 是以硝酸纤维薄膜为载体吸附抗原，用胶体金标记代替酶标抗体的免疫标记技术。 斑点金免疫层析实验（一步金法）：HCG 2. 细胞免疫检测 免疫细胞数量检测 免疫细胞的功能检测 淋巴细胞类型和数量的测定 （1）E花环试验：E花环试验可用于检测T细胞数目。EA花环试验可用于检测B细胞数目。 （2）荧光免疫法：常采用间接免疫荧光法。 （3）流式细胞术：用流式细胞仪（FCM)。 花环试验示意图 免疫细胞功能的测定----T细胞功能测定 体内法 ： 用生物抗原或 化学抗原作皮内试验。 OT-PPD皮试 SD-SK皮试 体外法 ： T细胞增殖试验（淋巴细胞转化试验） 形态学检查 3H-TdR掺入法 淋巴细胞转化试验（形态学示意图） 原理：人T细胞表面有PHA或ConA受体，T细胞在体外受PHA或ConA的刺激后能转化为体积较大、代谢旺盛、且能进行分裂的淋巴细胞，以此测定T细胞的功能。 PHA刺激 48~72小时 培养液 3H-TdR PHA 淋巴细胞 全血 分层液 离心 过滤 测量放射性 淋巴细胞增殖试验（3H-TdR掺入法）示意图 靶细胞 51Cr 洗涤 去除游离的51Cr 效应细胞 测量上清液中释放的51Cr 混合培养4-6小时 细胞毒试验（51Cr释放法）示意图 （二）体内免疫学检测 1.体液免疫检测 （1）Ⅰ型超敏反应皮肤试验： 变应原： 青霉素 免疫血清 植物花粉浸液 方法： 皮内注射 或划痕，20min 观察结果 结果：局部红斑、丘疹＞1cm或无红肿但局部有氧感，或全身不适者为阳性，有相应的IgE存在。 （2）中和反应皮肤试验： 临床常用的有检测对白喉及猩红热有无免疫力的锡克及狄克实验。 毒素抗毒素中和实验 微量外毒素 前臂屈侧皮内 阳性：局部红肿。表示受试者对此种外毒素无免疫力。 阴性：无反应。表明体内有相应的抗毒素中和外毒素，机体对此有免疫力。 24～48h 2.细胞免疫检测 （1）特异性抗原皮肤试验：主要有结核菌素、白色念珠菌素、皮肤毛癣菌素等,皮试抗原。皮内注射定量抗原后于24～48min观察结果，少数则要48～72min判定结果（如OT实验）。 （2）植物血凝素（PHA）皮肤实验：PHA是一种常用的非特异性有丝分裂原，注射于前臂屈侧皮内，6～12min后局部出现红斑和硬结，24～48min达高峰。PHA皮肤实验敏感性高，安全可靠，临床常用于检测机体的细胞免疫水平。 * 第四节 免疫学应用 应用免疫学理论阐明 疾病的发病机制和发展规律 应用免疫学原理和技术 诊断和防治疾病 重点：常见免疫学防治方法和常见的免疫学检测技术。 * 免疫学防治 免疫预防：利用各种生物或非生物制剂来建立机体的免疫应答，以达到预防疾病的目的。 用免疫学原理， 防病、治病所 采取的措施 免疫治疗：应用免疫学原理，针对疾病的发生机制，增强机体的免疫功能，以达到治疗目的所采取的措施。 * 特异性免疫类型 自然免疫 人工免疫 自然主动免疫：自然感染 自然被动免疫： IgG通过胎盘、初乳SIgA 人工自动免疫：接种疫苗、类毒素 人工被动免疫：动物免疫血清、胎盘球蛋白等 * （一）免疫学预防 1.人工免疫的概念和种类 通过人工的方法使机体获得免疫力，包括人工自动免 疫、人工被动免疫。 （1）人工自动免疫：是指给机体接种疫苗、类毒素等抗原 物质,刺激机体产生特异性免疫应答，以获得免疫力的方 法，也称预防接种。主要用于传染病的特异性预防。 （2）人工被动免疫：是给人体输入抗体等制剂，使机体获 得特异性免疫力。临