06第六讲 分子光谱技术课件.pptVIP

第六讲 分子光谱技术;;电磁波谱;波动性 A： 振幅 f： 震动频率（周/秒－c/s 、Hz） λ：波长（长度单位） τ： 周期（s/c） τ＝1/ν ν ：波数：每一厘米距离中通过波的数量（ 1/λ） ν= c/ λ c = 3.0×108 m/s ＝ 3.0×1010 cm/s 粒子性 移动的粒子、能量子、光量子、光子 二相性 E＝h · f＝ h · c / λ= h · c · f h＝6.026×10-34(J·s)=6.026×10-27(erg·s);分子光谱;分子光谱形成的机理;1;激发光谱与荧光光谱 ——如何获得？;荧光强度与物质浓度的关系曲线;价电子跃迁类型 σ→ σ* n → σ * π → π * n → π * 红移和蓝移（不同物质的光吸收不同） Ph-NH2 Ph-NH3+ －OH H＋ 230nm （ε8600） 203nm （ ε7500） 280nm （ε1470） 203nm （ ε160） Ph-OH Ph-O- H＋ －OH 211nm （ε6200） 236nm （ ε9400） 280nm （ε1450） 203nm （ ε2600） 增色效应和减色效应;仪器及原理; ; 光源： 发出所需波长范围内连续光谱，有足够光强度,稳定； 所用灯的不同提供光的区间范围也不同。 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm) 紫外—可见区：氙灯(180～800~900nm);单色器：核心部件 将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 棱镜:玻璃350～3200nm 石英185～4000nm 色散原理：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同； 特点：色散均匀，谱带宽窄不同；;光栅： 在镀铝玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕 (600、1200、2400条/mm ) 特点：波长范围宽、色散均匀、分辨性能好、使用方便。; 样品室 样品室：容纳各种光径的吸收池和附件。如流动池，微量池等。 在紫外区一定要用石英杯，可见区可用玻璃杯。 检测器 常用光电检测器：光电池、光电管、光电倍增管和光电二极管阵列。 放大装置、转换器和记录仪： 将测量信息放大并显示并输出。 ; ; ; ;萌裙肝气排取蜒辖删喳宪炔泡吊蒲方训阉涟美蛤伸梆铝猎赎梁雕腥讨洁劲06第六讲 分子光谱技术课件06第六讲 分子光谱??术课件;比尔－朗伯特（Beer-Lambert)定律 吸光度和物质的定量关系 A= log(I0/I) = a·b·c= - log(I/I0) = - logT T = I/I0 a=A/(b·c) （a：吸光系数） A=εb c （ε：摩尔吸光系数） ; ; ; ; ;小结;F-4500 荧光分光光谱仪（日本 Hitachi）;荧光分光光谱仪;荧光光谱仪工作原理示意图; ;其它附属设施;荧光光谱;;激发光谱与荧光光谱;荧光强度与物质浓度的关系曲线; TA 与Tb3+-apoOTF-Tb3+的作用（理解荧光光谱及其应用）;仪器功能;在蛋白质分析中的应用;紫外、可见光谱仪的应用;生物领域应用广泛 用于具有荧光的物质或标记荧光物质的发光性质及定量分析。均相体系生物分子与小分子之间的相互作用等。 ——荧光光谱和激发光谱 分辨荧光——测定荧光寿命 ms、ns、ps、fs;本节小结 吸收光谱和荧光光谱的特性 仪器的工作原理和组成 了解分子光谱分析的应用 简单介绍CD光谱的原理和应用;圆二色谱Circular Dichroism (CD);主要内容;CD原理;平面偏振光 (Plane polarized light);圆偏振光(Circular polarized light);圆偏振光;圆二色性(circular dichroism, CD);圆二色性的表示;圆二色仪原理;蛋白质的CD谱;The peptide bond is inherently asymmetric is always opt