作物生产论文发表2,4—D对香蕉胚性愈伤组织诱导的影响.PDFVIP

中国月期刊咨询网 作物生产论文发表2,4—D对香蕉胚性愈伤组织诱导的影响 作物生产论文发表期刊推荐 《中国果业信息》 沟通果业信息，聚焦产业发展,立足市场分析，预测市场动向，探讨业界重点、热点、难点问题，展示最 新科技成果。融新闻性、实用性、指导性、可读性为一 体，为我国水果生产、科技、经贸活动以及各级 政府业务主管部门、大型果场、龙头企业、产业协会规划决策提供参考。 摘要 以香蕉未成熟雄花序为外植体，以MS为基本培养基，对外植体进行表面消毒、不同切割长度处理、不同植物生 长调节剂(ZT、KT、2，4-D)在不同浓度情况下进行胚性愈伤组织诱导的试验。结果表明：外植体表面消毒以选用10% H2O2溶液处理效果最好，成功率为83.3%;切割长度以1.0 cm较为合适;胚性愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L ZT+0.5 mg/L KT+4.0 mg/L 2，4-D，胚性愈伤组织诱导率为12.3%。 关键词 香蕉,胚性愈伤组织,诱导 香蕉品种都是三倍体，且多为Musa spp.，AAA群[1]。它们具有高度不育性，不能通过传统的杂交育种方式获得优质 高抗性的香蕉新品种，利用基因工程、体细胞突变和体细胞杂交等方法，有望克服传统育种的限制，而生物技术的应 用都需要高效稳定的植株再生体系。其中，香蕉的胚性细胞悬浮系的建立就成为香蕉实现转移基因、细胞融合、植株 再生的关键技术[2-3]。因为胚性愈伤组织作为转化受体并诱导胚状体而再生的转基因香蕉可降低嵌合体发生，但是 香蕉的胚性愈伤组织诱导率过低成为影响香蕉的胚性细胞悬浮系建立的关键因素。已有研究表明[4-5]，不同的激素 种类及配比、外植体类型、培养条件对香蕉胚性愈伤组织的诱导有较大影响。研究ZT、KT和2，4-D在以香蕉未成熟 雄花序为外植体诱导胚性愈伤组织过程中的最适配比，以达到有效缩短香蕉胚性细胞悬浮系建立时间和提高其转化效 率的目的，为进一步开展香蕉的遗传转化奠定基础。 1 材料与方法 1.1 试验材料 供试香蕉品种为桂蕉B6(Musa spp.，AAA)，由广西植物组培苗有限公司提供，取自国家香蕉产业技术体系常规育种岗 位示范基地的无病、无虫、长势良好的香蕉植株。 1.2 试验方法 1.2.1 外植体表面消毒。以未成熟雄花序为外植体材料，剥除花序的苞叶，直至未成熟雄花序长3 cm左右，进行以下3种处理。处理1：在70%酒精中浸泡90 s后取出，用无菌水冲洗4～5次，切取花序尖端1.5 cm材料接入培养基;处理2：在70%酒精中浸泡30 s，再用1 g/L升汞(HgCl2)浸泡60 s后取出，用无菌水冲洗4～5次，切取花序尖端1.5 cm材料接入培养基;处理3：在70%酒精中浸泡30 s，再用10% H2O2溶液处理60 s后取出，用无菌水冲洗4～5次，切取花序尖端1.5 cm材料接入培养基。每个处理100个样品，7 d后统计消毒情况，3次重复。 成功率(%)=1-污染率-死亡率 1.2.2 不同长度外植体对愈伤组织诱导的影响。以未成熟雄花序切段为外植体材料，按切割长度设3个处理，即切割成0.5 g/L蔗糖[6]，每个处理100个样品，30 d转接1次，150 d后统计愈伤组织的诱导情况，3次重复。 1.2.3 不同培养基对愈伤组织诱导率的影响。以MS为基本培养基，设计以ZT添加浓度0、0.5、1.0 mg/L;KT添加浓度0、0.5、1.0 mg/L;2，4-D添加浓度0、2.0、4.0、6.0 g/L、蔗糖40 g/L、琼脂6.5 g/L，灭菌前pH值调至5.8，按每瓶30 mL进行分装，在121 ℃灭菌20 min后，进行香蕉愈伤组织诱导试验。愈伤组织诱导在黑暗条件下进行，培养室温度为28 ℃。每个处理100个样品，30 d转接1次，150 d后统计愈伤组织的诱导率，3次重复。 中国月期刊咨询网 诱导率(%)=愈伤组织诱导数/接种外植体数×100 2 结果与分析 2.1 不同处理方法对外植体消毒效果的比较 同种外植体应用不同的处理方法，其结果相差较大：处理1的污染率最高，但外植体的死亡率比处理2低，处理1的成 功率略高于处理2;处理2的污染率较低，但是由于使用升汞进行消毒，所以出现了较高的死亡率，致使最后的成功率 最低;处理3选择10% H2O2溶液对外植体材料进行处理，效果最佳，污染率最低，成功率最高。 2.2 不同长度外植体对香蕉胚性愈伤组织诱导的影响 幼嫩的未成熟雄花序接种到培养