第十三次应力分光光度法.pptVIP

第7章 吸光光度法;吸光光度法：分子光谱分析法的一种，又称分光光度法，属于分子吸收光谱分析方法 基于外层电子跃迁;7.2 吸光光度法基本原理;?/nm;例如：CuSO4溶液;吸收光谱曲线：物质在不同波长下吸收光的强度大小 A～l关系 最大吸收波长 lmax：光吸收最大处的波长;Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱;原子光谱为线光谱 分子光谱为带光谱;不同物质吸收光谱的形状以及?max 不同 ——定性分析的基础 同一物质，浓度不同时，吸收光谱的形状相同，Amax 不同 ——定量分析的基础;四、朗伯-比尔定律;朗伯定律:(1760) A=lg(I0/It)=k1b 当入射光的? ,吸光物质的c 一定时,溶液的吸光度A与液层厚度b成正比.; 当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液的吸光度与溶液中吸光质点的浓度及光程（溶液的厚度）成正比关系－－－朗伯比尔定律 －－－光吸收定律 数学表达：A＝lg(1/T)=Kbc 其中，A:吸光度，T:透射比， K:比例常数，b:溶液厚度，c:溶液浓度;吸光度A、透射比T与浓度c 的关系;灵敏度表示方法;溶液浓度的测定;标准比较法： As = ? b cs （标准样品) Ax = ? b cx （待测样品) 注意: 用比较法测定时，所用标准溶液浓度应与待测 溶液的浓度相接近，且实验条件应相同。;五、吸光度的加和性与吸光度的测量;方便、灵敏，但准确度差，常用于限界分析。;二、光电比色法; 滤光片;三、 分光光度法和分光光度计;常用光源;氙灯;单色器 作用:产生单色光 常用的单色器：棱镜和光栅;检测器 作用：接收透射光，并将光信号转化为电信号 常用检测器： 光电管 光电倍增管 光二极管阵列;1)单光束分光光度计;2) 双光束分光光度计;多通道仪器（Multichannel Instruments） 光电二极管阵列(通常具有316个硅二极管) photodiode arrays (PDAs) 同时测量200～820nm范围内的整个光谱, 比单个检测器快316倍,信噪比增加3161/2 倍. ;7.4 显色反应及影响因素;二、 显色反应的影响因素（显色反应条件）;b 显色剂的用量;e 溶剂; （一）、无机显色剂 钼酸铵法(测 P、 Si、W)， 过氧化氢法(测V5＋、Ti4＋) （二）有机显色剂（主要使用） 1、O，O给电子螯合剂： 铬天菁S（CAS）、苯基荧光酮（ PF ） 2、O，N给电子螯合剂：偶氮胂III等;3、N，N给电子基团：邻二氮杂菲（测Fe）等 4、带含硫基团的螯合剂：双硫腙（测Cu、Pb、Zn、Cd、Hg等）;7.5 光度分析法的设计;7.6 吸光光度法的误差;一、非单色光引起的偏移;非均匀介质 胶体，悬浮、乳浊等对光产生散射，使实测吸光度增加，导致线性关系上弯;吸光度标尺刻度不均匀;测量误差公式推导:;*; 实际工作中为使测量的浓度相对误差较小，吸光度A控制在0.2~0.8之间。 措施： 通过富集、稀释和增减比色皿长度，使测量的吸光度范围在0.2~0.8之间。;7.7 吸光光度法的应用;二、多组分的测定;三、高浓度溶液的示差光度法测定;操 作;示差法提高准确度的实质;四、 光度滴定;典型的光度滴定曲线;五、络合物组成的测定;2. 等摩尔连续变化法:;六、一元弱酸离解常数的测定;MO吸收曲线;1 了解分子对光的吸收与溶液颜色的关系. 吸收曲线—定性分析的基础。 定量分析的基础—朗伯-比尔定律：A=?bc=-lgT 式中各参数的物理意义，定量计算。 2 了解目???比色法、分光光度法的特点，分光光度计的基本部件。 3 灵敏度的表示—摩尔吸光系数的意义和计算； 准确度—适宜的测量范围、偏离比尔定律的原因。 4 显色反应及条件的确定: 显色剂用量、酸度、时间、温度、干扰及消除。 5 应用: 单一组分测定示例、多组分测定、光度滴定、络合物组成的测定、酸碱离解常数的测定。