海南新生儿葡萄糖-6一磷酸脱氢酶缺乏症的基因突变型分析.PDFVIP

大连医科大学学报 Vol.29 No.6 第 29 卷第6 期 Dec. 2007 2007 年 12 月 Journal of Dalian Medical University 海南省新生儿葡萄糖 -6 一磷酸脱氢酶缺乏症的 基因突变型分析 王洁，黄慈丹，赵振东，杨春 (海南省新生儿疾病筛查中心，海南海口 570206) 摘要: [目的]通过对新生儿疾病筛查中确诊的葡萄糖 -6 -磷酸脱氢酶(G6PD) 缺乏症患儿进行基因检测，确定海 南省新生儿G6PD 缺乏症的分子生物学基础。[方法]通过荧光斑点法在新生儿群体中筛查出可疑或阳性者，经 G6PD/6GPD 比值法确诊。将G6PD 缺乏症患儿静脉血做 DNA 直接扩增法( PCR) 、 PCR 一等位基因特异的寡核4辛 酸探针(PCR - ASO) 分析、 PCR - F民告小性片段长度多态性(PCR - RFLP) 分析和 PCR 一羊链构型多态性(PCR - SS- CP) 分析，检测基因突变。[结采J G6PD 缺乏症新生儿 51 例中属于 G1 376T 的 16 例(31. 37%) 、属于 G1 388A 的 11 例 (21. 57%) 、属于 A95G 的 4 例 (7.84%) 、属于 G392T 的 2 例 (3.921毛)、属于 G871A 的 2 例 (3.929毛)、属于 A835T 的 1 1f1( 1. 969毛) ，属于 T517C 的 l 例( 1. 96% ) ;余 14 例没有发现上述突变。[结论]海南省新生儿G6PD 缺 乏症的基因突变型与我国该遗传病其他高发地区的基因突变谱相似;未发现A835G-G6PD 一海口突变型c 关键词:新生儿;葡萄糖 -6 一磷酸脱氢酶缺乏症;基因突变 中图分类号:R394. 3 文献标识码:A 文章编号: 1671 -7295 (2007) 06 - 0544 - 02 葡萄糖 -6 -磷酸脱氢酶( glucose - 6 - phosphate dehy- TE 溶解。 drogenase •G6PD ,EC1. 1. 1.49) 缺乏症是由于G6PD 基因突 1. 3 号|物设计 变引起的一种 X 一连锁不完全显性遗传性疾病，截止 1998 在检测突变的引物下游3 端3 -5 个碱基处增加一个错 年全世界已报道G6PD 基因突变型有 122 种，中国人有 15 配碱基。 种，在广东、广西、云南等南方地区高发，分布在多民族中[1 1. 4 PCR 条件 PCR 反应使用 PE480PCR 扩增仪，50μL 反应体系中含 海南省也是G6PD 缺乏症高发地区之一。作者通过荧光斑 基因组 DNA 2μL( 浓度 200 ng/ μL) ，引物各 2μL( 浓度 10 点法将在新生儿群体中筛查出的可疑或阳性者，经 G6PDI 6GPD 比值法确诊的51 例 ωPD 缺乏症患儿，用其静脉血做 mmoV L , ) dNTP 各4μL( 浓度 2.5 mmoV L) ,TaqDNA 聚合 酶0.5μL( 浓度 5UI μL， Promega 公司) ，缓冲液( tris DNA 直接扩增法(PCR) 、 PCR 一等位基因特异的寡核昔酸探 针(PCR - ASO) 分析、PCR -限制性片段长度多态性(PCR