干种子高质量总RNA的快速提取方法.PDF

植物遗传资源学报2010，11(3)：360-363 ofPlantGeneticResources Journal 干种子高质量总RNA的快速提取方法 胡群文1’，陈晓玲1，张=…k-．1，辛霞1，卢新雄1，刘 旭1 (1中国农业科学院作物科学研究所／农业部作物种质资源与生物技术重点开放实验室，北京100081； 2安徽省安庆市种植业管理局，安庆246001) 摘要：高效快速提取高质量的种子RNA是种子分子生物学研究的基础。现有的提取方法难以高效快速地从种子中得到 表达研究，并为从具相似成分的其他物种干种子提取总RNA提供参考方法。 关键词：种子；总RNA提取；SDS；异硫氰酸胍；RNA反转录；RT—PCR Methodof TotalRNAfrom Seeds A Extraction Rapid HighQuality Dry HU Zhi．e1，XIN Xul Qua．wenl”，CHENXiao．1in91，ZHANGXial，LUXin．xion91，LIU (1Key of ResourcesBiotechnology， LaboratoryCropGermplasm Sciences，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Beijing100081； MinistryofAgriculture／InstituteofCrop 2Bureau ofplantingmanagementofAnqingCity，Anqing246001) of RNAisthebaseforseedsmolecular isolationof Abstract：Extraction biologyresearch．Rapid high-quality totalRNAfrom seedsisdifficulttheextractionmethods thisnew high—quality dry by reportedpreviously．Inproto- and methodswerecombinedforRNAextractionand oftotalRNA col，SDSguanidiniumthiocyanate high—quality wasobtainedinabout3．5h．Extractionatlow of with of pH，precipitationpolysaccharidespotassiumacetate，usage blocker RNAfrom rice，soybean，broad phenol polyvinylpolypyrrolidone(PVPP)yieldedhigh-quality bean，kidney beanand withasmallnumberof of0．01—0．1 extractedRNAwassuitableforRNAreverse peanut samples