东北山葡萄酵母菌基因组DNA提取方法的比较研究.PDFVIP

安徽农业大学学报, 2014, 41(6): 1017-1019 Journal of Anhui Agricultural University [DOI] 10.13610/ki.1672-352x015 网络出版时间：2014-10-29 10:56:32 [URL] /kcms/doi/10.13610/ki.1672-352x015.html 东北山葡萄酵母菌基因组 DNA 提取方法的比较研究 王晓娥，陈长武 (吉林工程技术师范学院食品工程学院，长春 130052) 摘 要：利用液氮研磨法、蜗牛酶法和玻璃珠法提取东北山葡萄分离的酵母菌株 S60 基因组 DNA ，采用琼脂 糖凝胶电泳、微量核酸蛋白测定仪和 PCR 方法检测基因组 DNA 的纯度和浓度。结果显示，蜗牛酶法提取的酵母 菌基因组 DNA 纯度最好、浓度最高；液氮研磨法提取的基因组 DNA 浓度虽然较高，但含有较多的蛋白等杂质； 玻璃珠法提取的酵母菌基因组 DNA 纯度和浓度均最低。 关键词：东北山葡萄；液氮研磨法；蜗牛酶法；玻璃珠法；DNA 提取 中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：1672−352X (2014)06−1017−03 Methods of genomic DNA extraction from the yeast isolated from Vitis amrensis Rupr in Northeast China WANG Xiao′e, CHEN Changwu (College of Food Engineering, Jilin Teacher’s Institute of Engineering and Technology, Changchun 130052) Abstract: Liquid nitrogen, snailase, and glass beads were used to extract genomic DNA from the yeast S60 isolated from Vitis amrensis in Northeast China. The DNA quality was examined using agarose gel electrophoresis, spectrophotometer ND-2000, and PCR. The result showed that the quality of the genomic DNA extracted using snailase method was best. Liquid nitrogen method resulted in high protein content and the glass beads method obtained the lowest DNA yield. Key words: Vitis. Amrensis; liquid nitrogen grinding; snailase; glass beads; DNA extraction 酵母菌是葡萄酒酿造的关键因素之一，其遗传 高效而精准地选择目标基因，因此，提取高质量酵 多样性分析和分类鉴定是选育优良酿酒酵母菌种的 母菌基因组 DNA 成为遗传育种最基础的工作。作 重要基础[1-2] 。随着葡萄酒产业的快速发展，在全世 者采用 3 种方法对东北山葡萄分离的天然酵母菌株 界范围内出现了“ 同质化”现象，不仅为生产者带来 进行基因组 DNA 提取条件的摸索研究，旨在为选 极大风险，同时削弱了消费者对葡萄酒的兴趣，因 育优良的东北山葡萄酵母菌种提供理论依据。 此具有独特香气和口感的葡萄酒研发势在必行[3-5] 。