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第13章可见分光光度法与.ppt第13章可见分光光度法与.ppt
第十三章 可见分光光度法和紫外分光光度法
Visible Spectrophotometry and Ultraviolet Spectrophotometry
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内容提要
物质的吸收光谱
分光光度法基本原理
透光率和吸光度
Lambert-Beer定律
可见分光光度法
分光光度计
测定方法
提高测量灵敏度和准确度的方法
紫外分光光度法简介
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教学基本要求
了解光的基本性质及物质对光的选择性吸收。了解吸收光谱的意义。
掌握分光光度法的基本原理,Lambert-Berr定律以及透光率、吸光度、摩尔吸光系数、质量吸光系数等基本概念及相互关系。了解光的加和性。
了解分光光度计的基本构造,熟悉可见分光光度法的测定方法标准曲线法和标准对照法,了解比吸光系数比较法和差示分光光度法。
了解提高测量灵敏度和准确度的方法。
了解紫外分光光度法的一般概念
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第一节 物质的吸收光谱
一、物质对光的选择性吸收
光照射某物质,物质能够吸收光,使原有的基态转为激发态,只有当分子的能量(h)与被照射物质粒子的基态和激发态能量之差(E)相等时才能被吸收。
M(基态)+ h M*(激发态)
物质对光的吸收具有选择性,若溶液选择性地吸收了某种颜色的光,则溶液呈吸收光的互补光。
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第一节 物质的吸收光谱
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第一节 物质的吸收光谱
二、物质的吸收光谱
将不同波长的单色光依次通过有色溶液,测量溶液的吸光度A(absorbance)。
以波长为横坐标,吸光度A为纵坐标作图,得吸收曲线,或称吸收光谱。
吸收光谱中,吸光度最大处的波长为最大吸收波长,用max表示。
一般,max是定性鉴别物质的基础 。
不同浓度的溶液,max不变,浓度与峰值成正比,这是进行定量分析的依据。
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第一节 物质的吸收光谱
三(邻二氮菲)合铁(II)离子的吸收光谱图
max=510nm
不同浓度的溶液,max不变,浓度与峰值成正比。
熊蚌照娠煤研矫喻玄堤颤泞宗蜕四啊降认特帘跺枪貉范音卖谎嘛楚越写丢第13章 可见分光光度法与第13章 可见分光光度法与
第二节 分光光度法基本原理
一、透光率和吸光度
入射光强度I0,吸收光强度Ia,透过光强度It, 反射光强度为Ir
I0 ═ Ia + It + Ir
被测溶液和参比溶液的吸收池同样材料和厚度,反射光强度影响相互抵消,上式简化为
I0 ═ Ia + It
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第二节 分光光度法基本原理
一、透光率和吸光度
透射光的强度It与入射光强度I0之比称为透光率(transmittance),用T表示
透光率的负对数称为吸光度,用符号A表示。A愈大,溶液对光的吸收愈多。
攘西痪磁博淬夏容劫碌户即霍弧屯牟树舔狙涅剿乖刮借外拭绷从痹善鲍首第13章 可见分光光度法与第13章 可见分光光度法与
第二节 分光光度法基本原理
二、Lambert-Beer定律
Lambert- Beer定律:
A =bc
溶液厚度b,单位cm;浓度c,单位molL-1;摩尔吸光系数,单位Lmol -1cm-1
若用质量浓度代替c
A ═ ab
质量吸光系数a的单位Lg -1cm-1
a和可通过下式相互换算
═ aM
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第三节 可见分光光度法
一、分光光度计
主要部件
光源 单色光器 检测器
吸收池 讯号处理及显示器
光源:钨灯,发出320~3 200nm的连续光谱,
单色光器:以棱镜或光栅分光,提供单色光。
吸收池:分光光度计中用来盛放溶液的容器。
检测器:通过吸收池的光转换为光电流,再经放大输入指示器,然后显示。
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