毛囊来源的神经嵴干细胞修复大鼠坐骨神经缺损 - 微生物所期刊联合 .pdf

生 物 工 程 学 报 张路 等/毛囊来源的神经嵴干细胞修复大鼠坐骨神经缺损 605 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn April 25, 2014, 30(4): 605−614 DOI: 10.13345/j.cjb.130527 ©2014 Chin J Biotech, All rights reserved 组织工程与细胞培养 1,3 2 2 4 1,3 张路 ，张洁元 ，李兵仓 ，刘争 ，刘彬 1 400715 2 400042 3 400715 4 400016 , , , . , , 2014, 30(4): 605−614. Zhang L, Zhang JY, Li BC, et al. Transplanted epidermal neural crest stem cell in a peripheral nerve gap. Chin J Biotech, 2014, 30(4): 605−614. 摘 要: 毛囊来源的神经嵴干细胞 (Epidermal Neural Crest Stem Cell, EPI-NCSC) 由于取材方便，具有多种分 化潜能，是一种具有良好应用前景的组织工程种子细胞。目前，在神经损伤修复领域中，EPI-NCSC 主要被应 用于脊髓损伤的修复。为了探讨 EPI-NCSC 对周围神经缺损的修复作用，对原代培养的 GFP-SD 大鼠来源的 EPI-NCSC 的体外性质进行了考察，并以其为种子细胞，将其等量与细胞外基质(Extracellular matrix, ECM)混 合后，预置入聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(Poly lactic acid co glycolic acid copolymer, PLGA)导管中，同时，以等 量的达尔伯克( 氏) 改良伊格尔( 氏)培养基(Dulbeccos Modified Eagles medium, DMEM)代替 EPI-NCSC 作为对 照，以用于修复大鼠坐骨神经 10 mm 距离的缺失。噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium, MTT) 比色分析结果显 示，EPI-NCSC 在 PLGA 膜上的初期粘附率为 89.7%。在第 1、3 、5 、7 天细胞相对增殖率分别为 89.3%、87.6% 、 85.6%和 96.6% 。细胞周期与 DNA 倍体分析表明，与 PLGA 共培养的 EPI-NCSC 与单独培养的 EPI-NCSC 相比 较，二者的细胞周期变化趋势相同，增殖指数变化趋势也相同。在神经导管移植 4 周，术部实现了组织学水平 的修复。大鼠手术一侧后肢感觉功能有所恢复，坐骨神经指数有所提高。研究结果表明，在 PLGA 导管中预 置 EPI-NCSC ，有望实现较好的周围神经缺损的修复效果。 : 表皮神经嵴干细胞，周围神经，细胞外基质 (ECM) ，聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物 (PLGA) ，细胞周期 Received: October 13, 2013; Accepted: January 9, 2014 Supported by: National Basic Research Program of China (973 Program) (No. 2012CB518106), the State Key Laboratory of Trauma, Burn and Combined Injury (No. SKLZZ201003), National Natural Science Foundation of China (Nos.. Corresponding author: Bin Liu. Tel: +86-23-683678