Biotin Labeling Kit - NH2(1 mg) 技术手册.PDF

Biotin Labeling Kit - NH (1 mg) 技术手册 2 产品描述 Biotin Labeling Kit - NH 主要用于制备生物素标记的蛋白质，用于酶免疫分析(EIA)。NH - 2 2 Reactive Biotin 是试剂盒成分之一，它含有琥珀酰亚胺基(NHS)，能轻易地与蛋白质或其他 分子的氨基反应。该试剂盒中的过滤管可用于除去干扰标记反应的小分子。整个标记过程十 分简便。只需将NH2 - Reactive Biotin 加入到IgG 溶液中，37 ℃培养 10 分钟即可。过量 的生物素分子能够使用过滤管将其除去。该试剂盒中包含了标记所需的全部试剂，包括储存 缓冲液。 试剂盒内含 NH - Reactive Biotin ··········1 管 2 WS Buffer ···············13 ml x 1 Reaction Buffer ············1.2 ml x 1 Filtration Tube ·············1 管 15 ml Tube （用于平衡）········1 管 适用范围 一个样品标记 样品需求：分子量50,000，具有反应性的氨基 储存条件 储存于0-5 ℃，未开封试剂在0-5 ℃能稳定保存6 个月 ＊一旦密封铝箔袋打开，请确保使NH - Reactive Biotin 保存在铝箔袋中，并在-20 ℃下紧 2 闭袋口。该试剂盒中的其他试剂可在0-5 ℃保存。 所需仪器 （试剂盒以外） 200 l 和1 ml 的移液器 37 ℃培养箱 DMSO 离心机以及15 ml 离心管的转子 容量2 ml 的试管（用于保存标记产物） 注意事项 ・如果 IgG 溶液中含有分子量大于 10,000 的标记对象以外物质，比如血清白蛋白或明胶， 请先纯化IgG 溶液，并使用纯化后的蛋白进行标记，否则可能会干扰整个标记反应。 ・如果IgG 溶液含有不溶性的小分子物质，离心后取上清来进行标记。 ・0-5 ℃保存时或从0-5 ℃回到室温的阶段，有时会在过滤管内部出现像水滴一样的液粒。 此现象是来自在Filter 上防止干燥剂的液粒化，不会影响实验操作。 标记IgG 操作步骤 a) 1. 将1 ml WS Buffer 以及含有1 mg IgG 的样品溶液加入到Filtration Tube 中 。准备1 支 b) 15 ml 的管子 。 c) 2. 用移液器吹打使其混合并以6,000 x g 离心30 分钟 。 3. 再向Filtration Tube 中加入1 ml WS Buffer b) 。 c) 4. 以6,000 x g 再离心30 分钟 。 d) 5. 将100 l DMSO 加入NH - Reactive Biotin 中，并用移液器吹打使其溶解 。 2 6. 将900 l Reaction Buffer 加入Filtration Tube 中，再加入80 l NH - Reactive Biotin 2 和DMSO 的混合液。 7. 用移液器吹打数次使其混合，并在37 ℃培养10 分钟。