试验一细菌的形态结构.PPT

实验室规则 接触到病原菌，一定要坚持无菌操作 进实验室穿上白大衣，离开时反折 严禁饮食，也不要以手抚摸头、面等部位 若发生吸入菌液，割破手指等事故，必须报告老师 接触过菌液的吸管、玻片等器材，投入含有2 % ~3%来苏儿的容器内 实验完毕，整理桌面  一、显微镜的使用及细菌的观察 实验目的 掌握油镜的使用和保护 熟悉细菌的基本形态和特殊结构的镜下特点 掌握无菌操作 掌握革兰染色法 实验内容 操作： 油镜的使用 细菌材料玻片标本制备 革兰染色法（Gram Stain ） 示教 细菌的基本形态 链球菌 螺形菌 --- 弧菌（霍乱弧菌） 细菌的特殊结构 鞭毛（变形杆菌） 荚膜（肺炎链球菌） 芽胞（破伤风梭菌） 显微镜的使用原理 油镜的使用 先按低倍镜到高倍镜的操作步骤找到物像，并将观察部分移至视野的中央。 转动旋转盘，使高倍镜移向一侧，在盖玻片上滴一滴香柏油，然后将油镜对准通光孔，使油镜下端与香柏油接触(注意操作动作要慢，以免压碎玻片或损坏镜头)。 从目镜内观察，微微上下转动细调节器，至视野内出现清晰的物像时为止。 油镜使用完毕后，必须用拭镜纸沾少许二甲苯将油镜上的香柏油擦净，并用干的拭镜纸擦去二甲苯。 显微镜用毕后，升高镜筒，取下玻片标本，转动旋转盘，使每个物镜都不对准通光孔，再下降镜筒，使物镜接近载物台，将聚光镜降下，最后放回橱内。 细菌材料玻片标本制备 涂片------干燥------固定 固定的目的 ①?杀死微生物，固定其细胞结构 ②?保证菌体能牢固地粘附在载玻片上，以免水洗时被水冲掉 ③?改变菌体对染料的通透性，一般死细胞原生质容易着色。 革兰染色法－－原理 G＋菌胞壁结构致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不易透入。同时乙醇使细胞壁脱水形成一道屏障，阻止结晶紫—碘复合物从胞内渗出，故细菌仍保留初染时的紫色 G－菌胞壁结构较为疏松，肽聚糖层很薄，外膜含大量脂质，易被乙醇溶解，致使细胞壁通透性变大，使结晶紫--碘复合物被乙醇溶解析出而脱色，故细菌呈复染时的红色 革兰染色法 初染：滴加结晶紫染液,染1分钟,水洗. 媒染：滴加卢戈氏碘液,作用1分钟后,水洗. 脱色：加95%酒精2~3滴于涂片上,频频摇晃3~5秒钟后,斜持玻片,使酒精流去;再滴加酒精,如此反复2~3次,直至流下的酒精无色或稍呈淡紫色时为止,约半分钟。水洗 复染：滴加稀释石炭酸复红染1/2~1分钟,水洗,待干,油镜检查. （紫碘酒红、分分半半） 革兰染色结果 -- 阳紫阴红 凡能固定结晶紫与碘的复合物,而不易被酒精脱色,仍保留紫色,称为革兰阳性菌. 凡易能被酒精脱色,再经复染成红色的细菌,称为革兰阴性菌 观察（染色性，形态，排列） 革兰染色的意义 鉴别细菌：鉴别G+, G-,初筛标本 选择用药 致病物质 大多? G+　外毒素，G- 内毒素 示教 -- 细菌的基本形态 细菌从形态上分，主要有球菌、杆菌、螺形菌三种。 链球菌的示教片 霍乱弧菌的示教片 示教 -- 细菌的特殊结构 细菌的特殊结构：芽胞、荚膜、鞭毛，菌毛（电镜下观察） 芽胞——增强细菌对不良环境的抗性； 荚膜——抗吞噬、抗损伤、抗干燥； 鞭毛——运动器官，单生、双生、丛生、周生。 观察 鞭毛（变形杆菌） 荚膜（肺炎链球菌） 芽胞（破伤风梭菌） 破伤风梭菌 鞭毛（变形杆菌） 二、细菌的分布手指皮肤上细菌的检测 操作 (4人一组) 用手指直接涂于普通琼指平板上，放37℃温箱孵育，24小时后观察结果，记录有多少种不同特征的菌落。 三、病原性球菌 咽喉部细菌的检测 取灭菌棉拭在被检者咽喉部轻轻涂擦后，涂于血琼脂培养基一侧。 改用灭菌接种环作分离划线接种。 盖上平皿，倒置后在37℃孵育24h。 甲型链球菌