杜鹃叶片3种蛋白质提取方法的比较.PDFVIP

安徽农业大学学报, 2014, 41(3): 440-444 Journal of Anhui Agricultural University [DOI] 10.13610/ki.1672-352x005 网络出版时间：2014-4-23 15:00:21 [URL]/kcms/doi/10.13610/ki.1672-352x005.html 杜鹃叶片 3 种蛋白质提取方法的比较 1 1* 2 杨秋玉 ，耿兴敏 ，彭方仁 (1. 南京林业大学风景园林学院，南京 210037 ；2. 南京林业大学森林资源与环境学院，南京 210037) 摘 要：以映山红(R. simsii ）、马银花(R. ovatum) 、满山红(R. mariesii)和云锦杜鹃(R. fortunei)4 种杜鹃为实验材 料，采用 TCA- 丙酮法、酚法和 TCA- 丙酮-酚法 3 种蛋白质提取方法提取杜鹃叶片蛋白质，并应用双向电泳技术 （2-DE ）比较分析不同方法的蛋白质提取率、溶解性、完整性等的差异，确立适用于2-DE 分析的杜鹃叶片蛋白质 提取方法。结果表明，TCA- 丙酮法提取的蛋白溶解性差且粘稠，得到的蛋白质点少，不适合杜鹃叶片蛋白的提取； 酚法提得的蛋白质溶解性好，蛋白质点多，但是杂质较多，且此法不适用于映山红叶片蛋白的提取；TCA- 丙酮-酚 法提取的杜鹃叶片蛋白质位点较多且清晰，重复性也好，且 4 种杜鹃叶片蛋白的提取效果都比较好。因此，TCA- 丙酮-酚法被认为最适于杜鹃属植物叶片蛋白质的提取及分析。 关键词：杜鹃花；蛋白质提取；双向电泳 中图分类号：S685.21 文献标识码：A 文章编号：1672−352X (2014)03−0440−05 Comparison of leaf protein extraction protocols for 2-DE from four Rhododendron species 1 1 2 YANG Qiuyu , GENG Xinmin , PENG Fangren (1. College of Landscape Architecture, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037; 2. College of Forest Resources and Environment, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037) Abstract: In this study, three precipitation protocols of protein extraction for 2-DE proteomic analysis were used to extract the protein from leaf tissue of four Rhododendron species, and the extraction efficiency, solubleness, integrity of protein extractions were compared. The results indicated that the TCA-acetone protocol for protein ex- traction cannot be used to the Rhododendron.L because the extracted proteins were ropy and difficult to be redis- solved. Though extracted proteins with phenol protocol were eutectic and the spots in the 2-DE map