生物类经常用一些化学试剂配制方法.docVIP

生物类经常用的一些化学试剂的配制方法 l．乳酸苯酚固定液 乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。 2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中，贮存于棕色瓶中保存备用。用作培养基指示剂时，每1000mL培养基中加入lmL 1.6%溴甲酚紫即可。 3. V.P.试剂 CuSO4 1g，蒸馏水l0mL，浓氨水40mL，10% NaOH 950mL。先将CuSO4溶于蒸馏水中，然后加浓氨水，最后加入10%NaOH。 4. 0.02%甲基红试剂 甲基红0.1g，95% 乙醇760mL，蒸馏水100mL。 5. 吲哚反应试剂 对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL，浓HCl160mL。 6. Alsever’s血细胞保存液 葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g，蒸馏水l00mL。以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节pH 6.1，分装于三角瓶中(30～50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min，备用。 7. Hank’s液 (l)贮存液A液：(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g，MgCl2·6H2O1g，用双蒸馏水定容至450mL：(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。将I和II液混合，加氯仿1mL即成A液。 (2)贮存液B液：Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL，然后加氯仿1mL，酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解。 (3)应用液：取上述贮存液的A和B液各25mL，加双蒸馏水定容至450mL，113℃湿热灭菌20min。置4℃下保存。使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。 注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序加入，用适量双蒸馏水溶解，待前一种药品完全溶解后再加入后一种药品，最后补足水到总量。 (4)10%小牛血清的Hank’s液：小牛血清必须先经56℃、30min灭活后才可使用，应小瓶分装保存，长期备用。用时按10%用量加至应用液中。 8. 0.1mol/LCaCl2溶液 双蒸馏水900mL，CaCl2 11g，定容至lL，可用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌或12l℃湿热灭菌20min。 9. 0.05mol/L CaCl2溶液 双蒸馏水900mL，CaCl2 5.5g, 定容至lL，可用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌或12l℃湿热灭菌20min。 10. α淀粉酶活力测定试剂 (1)碘原液：称取碘11g, 碘化钾22g，加水溶解定容至500mL。 (2)标准稀碘液：取碘原液15mL，加碘化钾8g，定容至500mL。 (3 )比色稀碘液：取碘原液2mL，加碘化钾20g，定容至500mL。 (4)2%可溶性淀粉：称取干燥可溶性淀粉2g，先以少许蒸馏水混合均匀，再徐徐倾入煮沸的蒸馏水中，继续煮沸2min，待冷却后定容至100 mL(此液当天配制使用)。 (5)标准糊精液：称取分析纯糊精0.3g，用少许蒸馏水混匀后倾入400mL水中，冷却后定容至500mL，加入几滴甲苯试剂防腐，冰箱保存。 11. pH6.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 称取Na2HPO4·12H2O 45.23g，柠檬酸(C6H8O7·H20) 8.07g，加蒸馏水定容至1000mL。 12. 0.lmol/L磷酸缓冲液(pH7.0) 称取Na2HPO4·12H2O 35.82g，溶于1000mL蒸馏水中，为A液：称取NaH2PO4·2H2O15.605g，溶于l000mL蒸馏水中，为B液。取A液61mL, B液39mL，可得到100mL 0.lmol/L pH7.0的磷酸缓冲液。 13．测定乳酸的试剂 (l)pH9.0缓冲液：在300mL容量瓶中加入甘氨酸11.4g, 24%NaOH 2mL，加275mL蒸馏水。 (2)NAD溶液：NAD 600mg溶于20mL蒸馏水中。 (3)L（+）LDH：加5mg L(+)LDH于lmL蒸馏水中。 (4)D(-)LDH：加2mg D(-)LDH于lmL蒸馏水中。 14. Taq缓冲液(10×) Tris-HCl (pH8.4) 100mmol/L，KCl 500mmol/L，MgCl2 15mmol/L，BSA (牛血清清蛋白) 或明胶lmg/mL 15. dNTP混合液 dATP 50mmol/L，dCTP 50mmol/L，dGTP 50mmol/L, dTTP 50mmol/L。 16. 1%琼脂糖 琼脂糖lg, TAE100mL, 100℃融化后待凉至40℃倒胶，胶厚度约0.4～0.6。 17. TAE Tris碱4.84mL，冰乙酸1.l4