用TTC-脱氢酶活性测定法筛选焦化废水优势菌.pdfVIP

第34卷第8期 山 西 建 筑 V01．34No．8 · 202 · 2 o o 8年3月 SHANXI ARCHITECTURE Mar． 2008 文章编号：1009．6825{2008)08．0202-02 用TTC．脱氢酶活性测定法筛选焦化废水优势菌 张 良 杨云龙 摘 要：焦化废水是一种含有多种污染物的难降解废水 ，本试验通过测定焦化废水处理厂中不同菌株的TTC-脱氢酶活 性，从中筛选优势菌种，进一步试验证明优势菌使COD去除率最多可提高22．6％。 关键词：脱氢酶，TTC-脱氢酶活性，优势菌，T-I~DHA 中图分类号：TU992．3 文献标识码：A 焦化废水的处理一直是国内外污水处理领域的一大难题，该 烷提取TF，在波长485 nlXl处测出吸光度值。取吸光度值作为纵 污水中污染物组成复杂，含有挥发酚、多环芳烃和氧硫氮等杂环 坐标，TTC浓度作为横坐标绘出标准曲线。． 化合物，属较难生化降解的高浓度有机工业污水[ 。在各种难降 2．2．2 菌株脱氢酶的测定 解有机污染物处理技术中，利用优势菌的生物强化技术，在废水 将扩大培养好的新鲜菌液，5 000 r／min离心40 rain，弃去上 治理中已显示出其独特的作用_2』。本试验通过测定不同菌株脱 清液，加蒸馏水洗涤，4 000 r／min离心5 min，弃去上清液，称菌体 氢酶活性来筛选优势菌，并且进一步试验证明其对COD的去除 湿重。用蒸馏水配成浓度为30 g／L的待用菌液。取4支洁净干 率有一定的提高。 燥的25 mL比色管，1支放空白样，另外3支为平行样，分别加入 1 rIf】 ．脱氢酶活性的测定原理 实验待用菌液2 mL，Tris-HC1缓冲液2 mL和TTC-葡萄糖标准溶 生物处理废水的本质是酶促反应过程，水中的有机污染物是 液2 mL，空白样中不加TTC-葡萄糖标准溶液，加2 mL蒸馏水， 在微生物酶的催化下进行氧化分解的，无论在废水好氧处理还是 然后置于37℃±1℃恒温培养，记下开始显色的时间，2 h后，用 在污泥厌氧消化中，基质脱氢(包括脱电子)都是生化反应的关键 5 mL三氯甲烷提取TF，在波长485 nlXl处测出吸光度值。根据 步骤，脱氢酶活性水平直接关系到有机物降解速度以及生物处理 所测得的吸光度值，查标准曲线找出显色液中的TF浓度，然后根 设施的运行效果_5 J。实验中选用去色的TTC作为人为受氢体， 据下式计算所测样品的脱氢酶活性 2。 受氢后生成深浅不同的红色三苯基甲膳(TF)，采用三氯甲烷在常 DHA= 。 温下萃取。由于TF在485 nlXl附近又吸收峰，因而可以采用分光 其中，DHA为污泥脱氢酶活性，t~gTF／(mL·h)；A为标准曲 光度法在该波长处测其吸光度，进而根据标准曲线计算出TF的 线对应值，~gTF／mL；B为培养时间，h；C为比色时的稀释倍数 生成量，此值就是rrc脱氢酶活性(简称TTC-DHA)。 (当读出吸光度值大于0．8时，比色的各种显色液应适当稀释，稀 2 试验材料与方法 释多少倍应以吸光度值0．8以下为准，本实验用三氯甲烷稀释)。 2．1 试验材料 2．3 优势菌降解能力的测定 活性污泥：太原市第二焦化厂曝气池活性污泥。 驯化采用逐渐提高焦化废水配比的方法进行，逐次提高焦化 菌种：从上述污泥中分离纯化获得单一菌种29株。