水产品扇贝中沙门氏菌检测方法的优化.pdfVIP

第 13卷 第 5期 口岸卫生控制 实验研究 水产品扇贝中沙门氏茵检测方法的优化 张秀妍 马 琳 许 岩 桂英爱 大连市水产技术推广总站 (大连 ，116023) 王慧龙 大连理工大学(大连 ，116023) 摘要 对水产品扇贝中的沙门氏菌进行检测，用其阳性物质进行质量控制，避免了使用标准菌株的 繁琐，检测结果准确可靠。 关键词 水产品 沙门氏菌 检测 质控物质 中图分类号 R一33 文献标识码 B 1 引言 代表，按照GB4789．20—2003要求取样，制备样品。 在大多数沿海国家，水产品行业是税收的主要 2．3 方法 来源，在食品供应中也占有相当的份额。然而大多数 2．3．1 增菌培养 水产品，尤其是贝类，容易被微生物所污染。在世界 扇贝样 品的增菌培养 按照 国家标准 GB／T 各地的水产品食物中毒中，沙门氏菌食物中毒常占 4789．20—203的方法直接增菌。以无菌操作称取25g 首位。因此，对水产品和动物源性产品的致病菌检测 扇贝肉样品，加入 225mL缓冲蛋 白胨水，用均质器 中，沙门氏菌被列为必检项 目。 以8000r／min～10000r／min匀浆 1min，于36℃培 沙门氏菌是一种人畜共患的肠道致病菌，在 l0℃ 养 18h增菌。然后移取 10mL，转种于 100mL的氯 ～ 42℃都可生长，最适生长温度为35clC～37℃。沙门 化镁孔雀绿(MM)增菌液内，于42qC培养20h。同时 氏菌是革兰氏阴性无芽孢杆菌，有 2000多个血清 另取 10mL，转种于 100mL亚硒酸盐胱氨酸(SC)增 型，是一群形态和培养特性都类似的肠杆菌科中的 菌液中，于36℃的条件下培养 20h。 一 个大属。沙门氏菌 目前通用的检测方法是按照国 沙门氏菌阳性质控物质增菌培养 沙门氏菌阳 家标准 GB4789．20—203进行的常规检测 ，但是该方 性质控物质装于处于高真空状态的西林瓶中，从开 法在检测过程中需要采用沙门氏菌标准菌株进行对 启到测试结束均应按照无菌操作进行。该阳性物质 照，而标准菌株需要定期转种、复壮、专用冷藏箱放 开启后立即加入 0．5mL蒸馏水进行再水化 ，然后放 置等，操作步骤比较繁琐 ，增加了菌株污染环境的机 入 25mL的缓冲蛋白胨增菌液中。在 36℃的条件下 会，易给人身带来伤害。而在该论文中，利用辽宁省 增菌培养 18h。将该培养液平均分成两份，一份接种 检验检疫技术科学研究所研制的沙门氏菌阳性物质 于 100mLMM 中于42℃培养20h，另一份接种于 对水产品中沙门氏菌的定性检测进行质量控制，可 100mLSC中于 36℃培养 20h。 以有效克服常规检测方法中存在的缺点，减少了沙 2_3．2 分离培养 门氏菌外泄的机会，检测结果同样准确。 取增菌液一杯，划线接种于一个亚硫酸铋琼脂 2 材料和方法 平板和一个 DHL琼脂平板。两种增菌液可同时划线 2．1 材料 接种于同一个平板上，于36_+1℃培养24h，观察各 培养基及生化鉴定管购于北京陆桥技术有限责 个平板上生长的菌落。挑取可疑典型菌落进行革兰 任公司；沙门氏菌阳性质控物质购于北京兰伯瑞生 氏染色镜检 ；另挑取可疑菌落接种于TSI琼脂试管 物技术有限公司。 中，于36_+1℃培养24h，观察其培养特征。 2．2 样品