利用RAPD和ISSR分子标记对西瓜作图亲本的多态性分析.pdfVIP

１１００ 江苏农业学报（ＪｉａｎｇｓｕＪ．ｏｆＡｇｒ．Ｓｃｉ．），２００９，２５（５）：１１００～１１０７ 利用ＲＡＰＤ和ＩＳＳＲ分子标记对西瓜作图亲本的多态 性分析 １，２ ２ １ ２ ２ 羊杏平 ，　刘　广 ，　侯喜林 ，　徐锦华 ，　高长洲 （１南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室，江苏 南京 ２１００９５；２江苏省农业科学院蔬菜研究所，江 苏 南京 ２１００１４） ２＋ 　　摘要：　以西瓜为材料，对基因组ＤＮＡ的ＲＡＰＤ和ＩＳＳＲ分析体系中的Ｍｇ 、ｄＮＴＰｓ和引物浓度进行了优化。 ２＋ 筛选出的ＲＡＰＤ优化体系（２０ ｌ）为：引物０４ ｍｏｌ／Ｌ，ｄＮＴＰｓ２００ ｍｏｌ／Ｌ，Ｍｇ ２０ｍｍｏｌ／Ｌ，ＤＮＡ２０ｎｇ，１×Ｂｕｆｆｅｒ μ μ μ ２＋ 缓冲液，Ｔａｑ酶 １０Ｕ；ＩＳＳＲ优化体系（１６ ｌ）为：引物０２５ ｍｏｌ／Ｌ，ｄＮＴＰｓ１６０ ｍｏｌ／Ｌ，Ｍｇ １０ｍｍｏｌ／Ｌ，ＤＮＡ２０ μ μ μ ｎｇ，１×Ｂｕｆｆｅｒ缓冲液，Ｔａｑ酶０６４Ｕ。以远生态西瓜品种自交系６４１ ３和６ ２、及２３ １和４１ ２为作图亲     本，利用筛选好的ＲＡＰＤ和ＩＳＳＲ体系对作图亲本的多态性进行分析。结果表明，在作图亲本６４１ ３和６ ２中，   １８１个ＲＡＰＤ引物中有１１个引物不能有效扩增，其余 １７０个引物产生了５２５条扩增带，平均每个引物在基因组中 可检测到３０８个基因位点，其中可检测出多态性位点的引物有５５个，产生了７７条多态性扩增带，平均多态率为 １４６７％；６２个ＩＳＳＲ引物中有１７个引物不能有效扩增，其余４５个引物产生了１８８条扩增带，平均每个引物产生了 ４１８条扩增带，１５个多态性引物可以在双亲间检测到多态性位点２３个，平均每个多态性引物能扩增出１５３个多 态性位点，多态率为１２２３％。在作图亲本２３ １和４１ ２中，利用４９９个ＲＡＰＤ引物进行了基因组的扩增，其中   ４３个引物为非有效引物，４５６个引物产生了１４３１条带，平均每个引物产生３１４条带，１４２个多态性引物检测到了 ２４０个多态性基因位点，平均多态率为１６７７％。表明西瓜作图亲本间的遗传背景较狭窄。 关键词：　西瓜；ＲＡＰＤ；ＩＳＳＲ；体系优化；多态性分析 中图分类号：　Ｑ７８　　　文献标识码：　Ａ　　　文章编号：　１０００４４４０（２００９）０５１１０００８ ＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍＡｎａｌｙｓｅｓｏｆＷａｔｅｒｍｅｌｏｎ（Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓｌａｎａｔｕｓ）ＭａｐｐｉｎｇＰａｒ ｅｎｔｓＵｓｉｎｇＲＡＰＤａｎｄＩＳＳＲＭｏｌｅｃｕｌａｒＭａｒｋｅｒｓ １，２ ２ １ ２ ２ ＹＡＮＧＸｉｎｇｐｉｎｇ ，　ＬＩＵＧｕａｎｇ，　ＨＯＵＸｉｌｉｎ，　ＸＵＪｉｎｈｕａ，　ＧＡＯＣｈａｎｇｚｈｏｕ （１ＮａｔｉｏｎａｌＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｒｏｐＧｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＧｅｒｍｐｌａｓｍＥｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ，Ｃｏｌｌｅｇ