总糖的测定——酸水解法.docVIP

总糖的测定——酸水解法 原理 样品经乙醚除去脂肪，乙醇除去可溶性糖类后，用酸水解淀粉为葡萄糖，按还原糖测定方法测定还原糖含量，再折算为淀粉含量。 2适用范围及特点 此法适用于淀粉含量较高，而半纤维素和多缩戊糖等其他多糖含量较少的样品。对富含半纤维素、多缩戊糖及果胶质的样品，因水解时它们被水解为木糖、阿拉伯糖等还原糖，使测定结果偏高。该法操作简单、应用广泛，但选择性和准确性不及酶法。 3.试剂 ①乙醚 ②85%乙醇 ③6mol/L盐酸溶液 ④40%氢氧化钠 ⑤10%氢氧化钠 ⑥0.2%甲基红乙醇溶液 ⑦精密pH试纸 ⑧20%中性醋酸铅溶液 ⑨10%硫酸钠溶液 4.测定方法 ⑴样品处理 ①粮食、豆类、糕点、饼干、糕干粉、代乳粉等较干燥、易研细的样品：称取2～5克（含淀粉0.5克左右）磨碎、过40目筛的样品，置于铺有慢速滤纸的 漏斗中，用30ml乙醚分三次洗去样品中的脂肪，再用150ml85%乙醇分数次洗涤残渣以除去可溶性糖类。以100ml水把漏斗中残渣全部转移至250ml锥形瓶中。 ②蔬菜、水果、粉皮、凉粉等水分较多，不易研细、分散的样品：先按1：1加水在组织捣碎机中捣成匀浆。称取5~10g（含淀粉0.5克左右）匀浆于250ml锥形瓶中，加30ml乙醚振荡提取脂肪，用滤纸过滤除去乙醚，再用30ml乙醚分二次洗涤滤纸上残渣，以除去可溶性糖类。以100ml水把残渣转移到250ml锥形瓶中。 ⑵水解 于上述250ml锥形瓶中加入30ml6mol/L盐酸,装上冷凝管，置沸水浴中回流两个小时。回流完毕，立即用流动水冷却。待样品水解液冷却后，加入两滴甲基红，先用40%氢氧化钠调到黄色，再用6mol/L的盐酸调到刚好变为红色，再用10%氢氧化钠调到红色刚好褪去。若水解液颜色较深，可用精密pH试纸测试，使样品水解液的pH值约为7。然后加入20%醋酸钠，摇匀后放置十分钟，以沉淀蛋白质、果胶等杂质。再加入20ml10%硫酸钠溶液，以除去过多的 铅。摇匀后用水转移至500ml容量瓶中，加水定容，过滤，弃去初滤液，收集滤液供测定用。 空白试验：取100ml水和30ml6mol/L盐酸于250ml的 锥形瓶中，按上述方法操作，得试剂空白液。 ⑶测定 用DNS法测定。 5.结果计算 代入葡萄糖标准曲线即可得出结果。