双水相亲和萃取法从豆壳中分离过氧化物酶.pdfVIP

※工艺技术 食 品重兰嗤；i1 2004，Vo1．25,No．7 93 双水相亲和萃取法从豆壳中分离过氧化物酶 文 禹撷 1，邹少兰 ，林东强 ·，姚善泾 ， (1．浙江大学化学工程与生物工程系，浙江 杭州 310027； 2．江西萍乡高等专科学校，江西 萍乡 337000) 搐 耍：采用双水相金属螯合亲和萃取法从豆壳中分离过氧化物酶，考察了豆壳过氧化物酶在不同类型双水相系 统中金属螯合亲和配基聚乙二醇(PEG)-- 氨基二乙酸(IDA)--Cu(II)对亲和分配的影响，发现PEG／羟丙基淀粉(PES) 系统适合于金属螯合亲和分配豆壳过氧化物酶。进一步考察亲和配基加入量、成相聚合物分子量、系统组成、pH 等因素对PEG~ES系统亲和分配的影响，优化分离条件为：PEG20009％，PES20014％，PEG-IDA-Cu(II)l％， 豆壳过氧化物酶的分配系数达 40，纯化因子为2．8，回收率达到93％。 关键词：亲和分配；双水相系统；金属螯合；豆壳过氧化物酶 AffinityPartifionofSoybeanHullPeroxidaseinAqueousTwo-phaseSystems WENYu—xie，ZOUShao—lan，LINDong-qiang，YAOShan-jing (1．DepartmentofChemicalandBiochemicalEngineering，ZhejinagUniversity，Hnagzhou 310027，China； 2．PingxinagCollegeforProfessionalTrmning，Pingxinag 337000，China) Abstract：Metalchelatingaffinitypartitionwithaqueoustwo—phasesystem wasstudiedtoseparatetheperoxidasefrom soybeanhullextract．Theeffects0f椭 nityligand(polyehtyleneglycol(PEG)一iminodiaceticacid0DA)--Cu(n3)onhteaffinity partitionofsoybeanhullperoxidase(SHP)wereinvestigatedindifferenttypesofaqueoustwo-phasesystems．Th eresults indicatdehtatPEG／hydroxypropylstarch(PES)aqueoustwo—phasesystemWassuitableforaffmityextractionofSHP．Several factors，suchas addingamountofaffmityligand，molceulraweightofphase—ofrmingpolymer，systemcompositions，pH，etc．， wereoptimized．Th ebestsepraationconditionswere：PEG20009％．PES20014％andPED-IDA—Cu(II)l％．Thepartition coefficientofSHPcouldreach40，nadpurificationfactorWas 2．8wiht hterecoveryof93％． Keywords：affi nitypartition；aqueoustwo—phasesystem ；metalchelating；soybena hullperoxidase 中图分类号：Q814．1 文献标识码 ：A 文章编号：lOO2—6630(2004)07-0093-04 过氧化物酶(Peroxidase，EC1．11．1．7)是一类以血红 生物质兼容性好等优势而倍受关注 。对于表面具有组氨 素为辅基 的氧化还原酶，在食 品加工、农产 品贮藏、 酸和色氨酸等残基的天然蛋 白质或带有组氨酸标签的基 医疗诊断和木质素的生物合成等方面应用广