兴奋性氨基酸在1，2-二氯乙烷急性中毒性脑病发生过程中的作用分析.pdfVIP

竺里苎竺查竺 !!!!!苎!查竺竺兰竺竺竺查一 兴奋性氨基酸在1，2一二氯乙烷 急性中毒性脑病发生过程中的作用研究+ 研究生郭晓丽 导师牛侨教授 摘 要 【目的】探讨兴奋性氨基酸(EAA)存1，2二氯乙烷(】，2一DCE) 急性中毒性脑病发生过程中的作用，为阐明1，2一DCE急性。p毒性脑病 的发病机制提供科学依据。【方法】sD大鼠随机分组，静式吸入染毒。 之后采用(1)干湿重法测定大鼠脑皮质和髓质含水量。HE染色观察病理 形态学改变；(2)硝酸镧示踪法检测血脑屏障(BBB)通透性；(3)商效 液相色谱法(HPLC)检测脑组织中谷氨酸(Glu)、天冬氨阪(Asp)、 甘氨酸(Gly)及Y．氨基丁酸(GABA)含量的变化：(4)免疫组织化学 法观察N．甲基．D．天冬氮酸I型受体(NMDARl)、神经元型一氧化氮 合酶(nNOs)、c-fos以及抑凋亡基因bcI一2的表达情况；(5)未端脱氧核 甘酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋I：：。【结果】 1．(1)脑组织主要表现为细胞外水肿，镧示踪法检测到BBB通透性在 5．0g／m3组即有镧颗粒的大量渗漏。(2)巾高剂量染毒组大鼠大脑皮质 含水量与对照组比较。升高有统计学意义。染毒后不同观察时间组大 鼠，大脑皮质含水量分别高于对照组和观察oh组，差异具有统计学意 义；大脑髓质含水量仅在染毒后观察6h组具有统计学意义上的升高。 (3)与对照组比较，各剂量染毒组Glu含量都有升高，差异具有统计学 意义。与中剂量组比较，最高剂量组G】u含量的下降未见统汁学意义； 各剂量染毒组Asp含量的升高具有剂量一效应关系；Gly含量在各剂量 ’该{5I!题为周家自然科学基金资助项目(N03027lIl6)和帮分省自然基金囊助(氍z99t072) ．2- 山西医科大掌 2003届硕士研究生掌位。沦文 组的升高具有统计学意义。染毒后各观察组大鼠脑组织Glu和Asp含 量均显著高于对照组。但与观察Oh组比较，Glu含量仅在j!15l察dh组的 升高具有统计学意义：Asp含量随观察时问延长而不断增加；Gly含量 则在不断下降，最终至对照组水平：GABA含量同时也在下降，但尚未 见统计学意义。(4)免疫组织化学法可以清楚地看到，NMDARl阳性神经 元主要分布于大脑皮质和海马。nNOs阳性神经元仪分布在脑二I二和小脑 蒲肯野细胞。Fos蛋白在大脑皮质和海马星形胶质细胞表达，脑干和小 脑蒲肯野细胞层呈阴性反应，而Bcl．2蛋白的分布部位与它ni好相反， 位于脑干和小脑蒲肯野细胞层。(5)阳性细胞百分比计算结果：中高剂 量组大鼠NMDARl和nNOs表达数量明显增加，差异具有统计学意义。 染毒后不同时间观察组大鼠NMDARl和nNOs表达数量比对照射i和观察 Oh组都有明显增加，差异具有统计学意义。染毒后观察6h组JJIi『组织 nNOs以及大脑皮质NMDARl表达数量均比观察4h组有明显下降，差异 具有统计学意义：c—fos基因在染毒30min时即有阳性表达，在lh时 达到高峰，，3h时下降至对照组水平。bcl．2基因在染毒6h时丌始表达， 脱离接触后表达数量仍继续增加，在染毒后观察4h时达到峰值．6h时 下降至对照组水平。(6)未见凋亡阳性细胞。【结论】1．EAA可能通过 过度激活NMDARl参与l，2-DCE急性中毒性脑病继发性损害过程： 2．NO在l，2-DCE急性中毒性脑病中可能发挥保护作用；3．脑水肿为 血管源性为先的混合性水肿；4．脑组织未见细胞凋亡可能是hcl～2基 因抑制的结果。 关键词：1，2一二氯乙烷急性中毒性脑病兴奋性氨基酸 竺!苎竺查兰 !塑!!竺主竺墨竺竺竺兰苎一 acjdsin of of amino deVeIopment theroIe on e