双酶直接酶解米糠制备短肽的工艺优化 - 中国农业科学.pdfVIP

中国农业科学 2009,42(5):1744-1750 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.05.030 双酶直接酶解米糠制备短肽的工艺优化 1,2 1 2 1 1 1 1 1 俞明伟 ，张名位 ，孙远明 ，张 雁 ，魏振承 ，张瑞芬 ，唐小俊 ，池建伟 1 2 （广东省农业科学院生物技术研究所/农业部功能食品重点开放实验室，广州 510610 ； 华南农业大学食品学院，广州 510642 ） 摘要：【目的】建立在中低温度下直接酶解米糠制备短肽的优化工艺。【方法】采用二次回归正交旋转组合设 计优化直接酶解米糠制备短肽的工艺条件，其中总糖含量测定采用蒽酮比色法，水解度（degree of hydrolysis， DH）采用pH-stat法，蛋白质回收率采用凯氏定氮法。【结果】确定直接酶解米糠制备短肽最佳工艺条件为：米糠 先经糖酶 （viscozyme）反应2 h去除糖类杂质，然后用碱性蛋白酶（alcalase）和胰蛋白酶双酶水解，最适pH 8.2， 温度45℃，alcalase与胰蛋白酶酶活比59 ﹕41，总酶活5 750 U/g底物，水解时间3 h。在此条件下，DH为23.04%， 蛋白质回收率为 84.33%，酸溶性多肽（TCA-SN）为 68.40%，短肽分子量主要集中在 1 000 D 以下。【结论】在中 低温和偏中性（pH 8.2）条件下，采用碱性蛋白酶和胰蛋白酶双酶直接酶解米糠制备短肽，与先提取蛋白后酶解 制备短肽的方法相比，具有操作步骤简单、蛋白质利用率高等特点，是一种制备米糠肽的新途径。 关键词：米糠；肽；酶解工艺；水解度；蛋白质回收率 Study on Optimal Hydrolysis Process for Preparing Rice Bran Short Peptides with Two Enzymes 1,2 1 2 1 1 YU Ming-wei , ZHANG Ming-wei , SUN Yuan-ming , ZHANG Yan , WEI Zhen-cheng , 1 1 1 ZHANG Rui-fen , TANG Xiao-jun , CHI Jian-wei 1 ( Key Laboratory of Functional Food, Ministry of Agriculture/Bio-Technology Research Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510610 ; 2College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642) Abstract: 【Objective 】 To establish an optimal enzymatic hydrolysis process for short peptides directly from rice bran under low and med