微流控芯片电泳分离血清高密度脂蛋白亚类的研究 - 生物化学与生物 .pdf

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2010, 37(2): 2 18~223 流控芯片电泳分离血清高密度脂 蛋白亚类的研究* 1, 2) 1) 1)** 2)** 2) 郑慧斐 丛 辉 王惠民 金庆辉 赵建龙 1) 2) ( 通大学附属医院检验医学中心，南通226001； 中国科学院上海微系统与信息技术研究所，上海200050) 摘要 描述了一种微流控芯片电泳快速分离血清高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)亚类的方法 利用自制的微流控 芯片，结合激光诱导荧光检测系统，40 mmol/L Tricine 、50 mmol/L 甲基葡胺(MEG)、0.2 mmol/L SDS (pH 8.5)为样品缓冲液， 40 mmol/L Tricine 、50 mmol/L MEG 、0.0 1 mmol/L SDS (pH 8.5)为分离缓冲液，4 min 内HDL3 和HDL2 两种亚类得到基线分 离 该法操作过程简单，重复性较佳，测试费用低廉，在临床HDL 亚类的检测中具有较好的应用前景 关键词 微流控芯片电泳，高密度脂蛋白，分析 学科分类号 R446，R446.11 2 10.3724/SP.J.1206.2009.00506 + DOI: 高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)是 1.2 试剂与仪器 一种由脂质和蛋白质构成的，在形状、密度、颗粒 1.2.1 试剂 浓度为 15.5 g/L 的HDL 标准品、 大小、电荷和理化特性等方面都具有 大异质性的 Tricine 、甲基葡胺(N-methyl-D-glucamine, MEG)、 脂蛋白，它参与胆固醇逆运转，具有抗动脉粥样硬 十二烷基硫酸钠(SDS)、乙二醇、甲醇、磷钨酸 [1] 化(atherosclerosis, AS)作用 HDL 亚类成分可以 (phosphotungstic acid，PTA) 、氯化镁(MgCl ) 、溴 2 作为评估AS 的危险因素，与冠心 (coronary heart 化钾(KBr) 均购于美国Sigma 公司；硝基苯并噁二 disease，CHD) 密切相关，但对于亚类 HDL 和 唑 -C - 酰基鞘胺醇(NBD C -ceramide) 购于美国 2 6 6 HDL3 的相对重要性问题在临床上一直存在分歧， Molecular Probes 公司；沉淀剂按照中华医学会 国际上仍未得到统一认识，其中一重要原因是因为 检验学分会推荐的PTA-Mg 沉淀法中描述配制[7] 缺乏简易、准确的HDL 亚类分析方法 ( 1.52 mmol/L PTA、0.05 mol/L M