白藜芦醇探针同步荧光法测定蛋白质含量 - 应用化学.pdf

第２８卷 第７期 应 用 化 学 Ｖｏｌ．２８Ｉｓｓ．７ ２０１１年７月 　　　　　　　ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　　　　　　　 Ｊｕｌｙ２０１１ 白藜芦醇探针同步荧光法测定蛋白质含量  邢卫卫　崔凤灵 　毛润泽　程　姗　霍瑞娜 （河南师范大学化学与环境科学学院　新乡４５３００７） 摘　要　在ＴｒｉｓＨＣｌ缓冲溶液体系中（ｐＨ＝７４），白藜芦醇与人血清白蛋白相互作用，对蛋白的内源性荧光 产生猝灭作用，而且，同步荧光的强度与人血清白蛋白的浓度成正比。基于此，建立了以白藜芦醇为荧光探 针，运用固定波长同步荧光光谱法测定生物样品中蛋白质含量的新方法。体系同步荧光光谱特征及强度受 Δλ、反应介质和离子强度等因素的影响。在最佳实验条件下，体系的同步荧光强度（Ｉ）与人血清白蛋白在 １３８０～２７６０ｍｇ／Ｌ的浓度范围内呈良好的线性关系，检测限为１０３７ｍｇ／Ｌ（ｎ＝１１）。对血清、尿样和唾液等 生物样品进行测定，回收率在９３５％～１０５８％之间，与传统的考马斯亮蓝（Ｇ２５０）法作对照，结果一致。 关键词　白藜芦醇，人血清白蛋白，同步荧光光谱，考马斯亮蓝，三维荧光 中图分类号：Ｏ６５７．３　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００００５１８（２０１１）０６０８４９０６ ＤＯＩ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１０９５．２０１１．００４４６ 白藜芦醇（ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ，简称ＲＥＳ，结构见Ｓｃｈｅｍｅ１），化学名称为３，４′，５三羟基芪三酚（亦称芪三 酚），主要存在于虎杖、葡萄、桑椹和花生等植物中。它是植物在恶劣环境下或遭到病原体侵害时，自身 分泌的一种可抵御霉菌感染的抗菌素。目前至少已在２１个科、３１个属的７２种植物中发现，主要有抗 ［１］ 炎、抗肿瘤、抗氧化以及抑制血小板活性等性质 ，此外，它还可以抑制癌细胞的生命周期、降低患冠心 病的风险、降低总胆固醇、通过保护细胞线粒体中ＤＮＡ（脱氧核糖核酸）免遭化学损害而发挥延缓衰老 ［２］ 等多种生理功效 。 ＯＨ  師師 師師 帨帨  師師  師師 帨帨  ＯＨ ＨＯ Ｓｃｈｅｍｅ１　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ 血清白蛋白可广泛结合内源和外源性物质，如脂肪酸、代谢物、药物和金属离子等，起着储存和运输 ［３］ 的作用 。通过与药物相互作用，血清白蛋白可以控制药物释放和代谢，目前药物与血清白蛋白相互作 ［４６］ ［７８］ ［９］ 用的研究十分活跃 。药物分子与血清白蛋白作用的研究方法有电化学方法 、荧光光度法 和共 ［１０］ 振瑞利散射法 等测试技术。同步荧光光谱法于１９７１年被提出来，它具有常规荧光分析法所不具有