大分子化学修饰是降低甚至消除酶抗原性的有效方法之一.pptVIP

1、金属离子置换修饰的适用范围 只适用于本来在结构中含有金属离子的酶 用于酶修饰的金属离子：Ca2+, Mg2+, Mn2+, Zn2+, Co2+, Cu2+, Fe2+… 2、金属离子置换修饰的方法 乙二胺四乙酸（EDTA） Zn2+ 加入EDTA 加入Ca2+ Ca2+ EDTA-Zn2+ 锌型蛋白酶 钙型蛋白酶 ↑20~30% 透析 第三节 化学修饰酶的性质及应用 猪肝尿酸酶用白蛋白修饰: 最适pH由天然酶的10.5,下降到7.4—8.5 酶结构与功能的研究 提高酶的稳定性（热、酸碱、有机溶剂、蛋白水解酶） 减低或消除抗原性 改变酶的最适pH值以适应体内环境 延长体内半衰期 提高组织的选择性 提高酶的活力 酶化学修饰的应用 第6章 酶的功能改造 ——化学酶工程 本节内容提要 第一节 酶化学修饰简介 第二节 化学修饰的方法（案例解析） 第三节 修饰酶的性质特点及应用 通过化学手段使酶分子结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的过程，称为酶分子的化学修饰。 一、什么是酶的化学修饰？ 第一节 酶化学修饰简介 1.增强酶活性 2.增强酶的稳定性 3.消除或降低酶的抗原性 二、为什么要对酶进行分子修饰？ 修饰侧链基团（尤其是活性中心必需基团），研究酶结构和功能的关系 修饰功能基团结合水不溶性大分子，增加酶稳定性 酶分子内或分子间交联或与水不溶性载体结合，增加酶可回收重复利用性。 三、酶分子化学修饰主要内容 第二节 化学修饰方法 氨基的化学修饰 胍基的化学修饰 利用水溶性大分子与酶结合，使酶的空间结构发生某些精细的改变，从而改变酶的特性与功能的方法称为大分子结合修饰法，简称为大分子结合法。 三、大分子结合修饰 右旋糖酐、聚乙二醇、肝素、蔗糖聚合物、聚氨基酸等 1、常用的修饰剂 2、修饰方法 修饰酶 通过修饰提高酶的活性 3、大分子化学修饰的优点 核糖核酸酶 Vs 右旋糖酐修饰核糖核酸酶 1 ： 2.25 胰凝乳蛋白酶 Vs 右旋糖酐修饰胰凝乳蛋白酶 1 ： 5.1 通过修饰增强酶的稳定性 大分子化学修饰的优点 酶的半衰期t1/2：酶的活力降低到原来活力一半时所经过的时间。 很多修饰剂分子具有多个活性基团，常与酶形成多点交联，使酶的空间结构稳定，特别是使酶活性中心的构象得到保护。 举例：超氧化物岐化酶（SOD） O2- + O2- + 2H+ =H2O 2 +O2 SOD作用：保护DNA，蛋白质和细胞膜 SOD药用：类风湿性关节炎，白内障，膀胱炎，皮肤炎，红斑狼疮等。 SOD静脉注射：t1/2=6~30min 右旋糖酐-SOD：t1/2=7h 聚乙二醇-SOD：t1/2=35h 超氧化物歧化酶国家“十五”、“十一五”863计划重大课题项目 课题编号：2004AA214080，2007AA100604，由中国科学院国家重点实验室董志扬等人采用先进技术，历时八年开发出来的新一代SOD酶产品 产品技术专利号：ZL200510005207.9 通过修饰降低或消除酶的抗原性 大分子化学修饰的优点 当外源蛋白非经口进入人或动物体内后，体内血清中就可能出现与此外源蛋白特异性结合的物质，这些物质称为抗体，能引起体内产生抗体的物质称为抗原。 大分子化学修饰是降低甚至消除酶抗原性的有效方法之一：PEG-L-天冬氨酰酶 通过改变酶分子中所含的金属离子，使酶的特性和功能发生改变的方法称为金属离子置换修饰，简称离子置换法。 四、金属离子置换修饰