向日葵食用蛋白的提取和SDS-PAGE电泳技术研究.pdfVIP

天津农业科学 TianjinAgriculturalSciences ·植 物 生理 与生物技 术 向日葵食用蛋白的提取和SDS—PAGE电泳技术研究 刘宇新 ，靳力争 ，张仲国 ，鲁福成 ，苏丽妇B2 (1．天津市园艺工程研究所，天津 300384；2．天津市农业科学院，天津 300192) 摘 要：以向日葵种子为材料，采用SDS—PAGE电泳技术 ，以不同电泳条件对 23种向日葵食用蛋白进行电泳谱带分析试验， 研究不同电泳条件下向日葵食用蛋白的谱带变化 ，以选择出最佳的电泳条件。结果显示，最佳试验条件为：按照质量与体积 比 1：3的比例用去离子水在4℃条件下30min提取水溶性蛋白。电泳时，在4 条件下进行，凝胶板厚度 1mm，分离胶浓度8％， 浓缩胶浓度 5％，电压300V，加样量控制在 l0 。 关键词：向日葵 ；种子贮藏蛋白；聚丙烯酰胺凝胶电泳；品种纯度 中图分类号 ：$565．503．2 文献标识码 ：A DOI编码 ：10．3969／j．issn．1006—6500．2012．02．003 TechniealStudyontheEdibleProteinExtractionfrom SunflowerandProteinAnalysiswithSDS—PAGE ElectrOphOresis LIU Yu-xin，JIN Li-zheng，ZHANGZhong-guo，LUFu-cheng，SULi-Ha (1．TianjinHorticulturalEngineeringInstitute，Tianjin300384，China；2．TianjinAcademyofAgriculturalSciences，Tianjin300192，China) Abstract：Takingsunflowerseedsasmaterials，with differentelectrophoreticconditions，23kindsofediblesunflowerproteineiec— trophoresisbandwereanalyzedbySDSelectrophoresis，inordertostudythevariationsofelectrophoresisproteinbandsofedi— blesunflowerunderdifferentconditionsandchoosethebesteiectrophoreticconditions．Theresultsshowedthatoptimum conditions were：accordingtotheratioofweightandvolume1：3 ．deionizedwaterwasusedat4℃ for30mintoextractsolubleproteins．Elec— trophoresiswasdoneat4oCundertheconditionsofthegelthickness1mm，gelconcentrationof8％，5％ stackinggelconcentration， voltage300V，plussamplevolume10txL． Keywords：sunflower；seedstorageprotein；polyacrylamidegelelectrophoresis；varietalpurity 向日葵种子是优质食用油和优质蛋 白质的重 子贮藏蛋 白的最佳提取方法和最佳 SDS—PAGE 要来源之一_lJ。它含有球蛋 白、清蛋 白和油脂体蛋 电泳条件的确定及 SDS—PAGE电泳技术在 向 日 白等丰富的蛋 白质。目前，关于向 日葵的蛋 白分 葵品种鉴定上的应用进行了研究。 离、鉴定工作较少。Kumar等 ]运用 SDS—PAGE电 泳对向日葵的杂交种进行对比分析，并对杂种一 1 材料和方法 代的遗传纯度进行鉴定。谢宗铭等 _3j采用 SDS— PAGE电泳分离大量 向Et葵种子蛋 白，并将其应 1．1 试验材料 用于 自交系和杂交种的鉴定，获得 良好效果。 食葵：龙食葵、祥和；油葵 ：HA300(2002)、天龙 食用蛋 白即种子贮藏蛋 白。 自70年代 以 黑油 、2603、A01—6-7、89By一14、AS04—2、AS03