药学分子生物学（吕昌莲）fuxike 3.pptVIP

核内的蛋白质 小分子核糖核酸蛋白体 （snRNP） snRNA(small nuclear RNA) snRNP与hnRNA结合成为剪接体 （splicesome） ① 2. mRNA 5’端“加帽”和3 ’端“加尾” 大多数真核mRNA的5’-末端有7-甲基鸟嘌呤的帽结构。 这个真核mRNA加工过程的起始步骤由两种酶，加帽酶(capping enzyme)和甲基转移酶(methyltransferase)催化完成。 帽子结构： 帽子结构的功能： 增加mRNA稳定性，使mRNA免遭核酸酶的攻击。 为核蛋白体识别mRNA提供信号，促进蛋白质的生物合成。 促进某些RNA的合成。 尾部修饰是和转录终止同时进行的过程。 poly A是维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身稳定性的因素。 一般真核生物在胞浆内出现的mRNA，其poly A长度为100至200个核苷酸之间。 3’末端的聚腺苷酸化的特点和作用 （二）tRNA前体的加工 tRNA前体 RNA pol Ⅲ DNA 碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 目录 目录 第三章 转录及其调控 Transcription and regulation 转录 (transcription) 是生物体以DNA为模板，在RNA聚合酶催化下，以4种三磷酸核苷为原料，合成RNA的过程 。 定义 转录 RNA DNA 参与转录的物质： 模板: DNA 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 酶 : RNA聚合酶 ( NMP )n + NTP → ( NMP ) n+1 + PPi 其他蛋白质因子（转录因子） （一）RNA聚合酶由多个亚基组成 全酶 a2ββ’ ωσ 核心酶 a2ββ’ ω RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合: 二、原核生物转录过程 （一）原核生物转录起始 1. 原核生物RNA聚合酶与模板的辨认结合 开始转录 T T G A C A A A C T G T -35 区 (Pribnow box) T A T A A T Pu A T A T T A Py -10 区 1 -30 -50 10 -10 -40 -20 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? RNA-pol辨认位点 (recognition site) 5? 5? RNA聚合酶保护区 结构基因 3? 3? 用RNA聚合酶保护法研究转录起始区 2.原核生物转录起始过程 2. DNA双链局部解开，形成开放转录复合体(open transcription complex) 1. RNA聚合酶全酶(?2???ω?)与模板结合，形成闭合转录复合体(closed transcription complex) 转录起始过程： 3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应： RNApol (?2???ω?) - DNA - pppGpN- OH 3? 形成转录起始复合物: 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 4. 第一个磷酸二酯键生成后，σ因子即从转录起始复合物上脱落。 （二） 原核生物转录延长 1. ?亚基脱落，核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移，进入延长阶段。 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 转录空泡(transcription bubble)： RNA-pol （核心酶） ···· DNA ···· RNA （三）原核生物转录终止 转录终止指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 依赖 ρ 因子的转录终止 非依赖 ρ 因子的转录终止 依据是否需要蛋白质因子的参与，原核生物转录终止分为： ρ因子的作用 1. 依赖ρ因子的转录终止 （1）RNA转录产物末端有较丰富的C或有规律地出现C碱基，ρ因子结合此段序列，使RNA聚合酶构象发生变化，转录停顿。 （2）ρ因子具有ATP酶活性和解旋酶活性，使DNA/RNA杂化双链拆离，利于产物从转录复合物中释放 。 5′pppG 5? 3? 3?5? RNA-pol 2. 非依赖 ρ因子的转录终止 （1）DNA模板上靠近转录终止区有富含GC的反向重复序列，转录产物形成茎——环结构，使核心酶发生构象变化，转录停顿。 （2）茎——环结构之后出现连续的U,与DNA模板链的互补配对不稳定，R