成骨细胞在聚乳酸和海藻酸钙中生物相容性的实验分析.pdfVIP

成骨细胞在聚乳酸和海藻酸钙中 生物相容性的实验研究 硕士研究生： 向 川 指导教师： 姜长明 教授 专业名称： 外科学(骨外) 摘 要 目的f骨缺损的修复是骨科研究中的重点和难点。目前的方法一般是 采用自体骨和异体骨移植，但这两种方法均有各自的缺点。近年来组 织工程学的创立和发展，为骨组织修复提供了新的思路和方法。在组 织工程学中，生物可降解材料与相关细胞间生物相容性的研究是该学 科中的一个重要课题对本实验有以下两个目的： 1．通过对聚乳酸(PLA)、海藻酸钙与人髂骨骨膜成骨细胞复合 培养的实验结果进行对比．比较二者的生物相容性，为骨组织工程中 生物材料的选择提供依据。 2．通过对比2×104／ml、5×104／ml、10×104／ml三种不同浓度的 成骨细胞复合培养于海藻酸钙上所得出的实验结果，为骨组织工程中 生物材料上成骨细胞种植浓度的选择提供参考。 ／ f方法选无代谢性骨病的仅系骨折的青壮年患者9例(25．38岁，每例 ＼ 为一实验组)，在手术中分别切取髂骨膜约2×2cm2大小。将骨膜剪 为小碎块，经多种酶消化，置入培养瓶培养。待成骨细胞融合为单层 后，将其消化、吹打、计数，再进行传代培养。成功后，以不同浓度 加入各实验组的24孔培养板。各实验组分为5组，即对照组(接种 浓度2x104／m1)，聚乳酸组(接种浓度2X104／m1)，海藻酸钙l组(接 种浓度2X104／m1)，海藻酸钙2组(接种浓度5x104／m1)，海藻酸钙 3组(接种浓度10×104／m1)。在每例中每组各接种24孔。对照组单 纯接种细胞，聚乳酸组每-TLDN入3×3×O．5ram3大小的聚乳酸块，海 藻酸钙l、2、3组每孔加入3×3X0．5mm3大小的海藻酸钙凝胶块。 各组分别于第2、4、6、8天做组织形态学观察、细胞增殖测定、碱 性磷酸酶(ALP)活性测定、细胞蛋白含量测定。 结果1．对照组与聚乳酸组的细胞增殖测定、ALP活性测定、细胞蛋白 含量测定同期比较无明显差异。 2．对照组、聚乳酸组与海藻酸钙l组同期比较，以上指标有显著 差异(P0．01)。 3．海藻酸钙1组与海藻酸钙2组同期相比，以上指标无明显差异。 4．海藻酸钙1组与海藻酸钙3组同期比较，以上指标有明显差异 (P0．05)。 5．海藻酸钙2组与海藻酸钙3组同期比较，ALP活性与蛋白含 量有明显差异(P0．05)，而细胞增殖方面差异不显著。 6．随培养时间的延长，各实验组在细胞数量、ALP活性和蛋白 含量上均有增加(P0．05)J 结论l-聚乳酸和海藻酸钙对成骨细胞的生长和功能无干扰破坏作用， 均具有良好的生物相容性。 2．海藻酸钙对成骨细胞的增殖还具有一定的促进作用，其生物相 容性优于聚乳酸。 组的对比研究中，以10×104／ml组结果最佳。 4．在2、4、6、8天四个不同时间点各个测试指标的对比研究中， 以第8天的测试结果最佳。 【关键词I 成骨细胞。组织工程 生物材料V生物相容性√ ACID oNPoLYLACTIC STUDIES BIoCoMPATIBILITY WITH ALGINATECOMBIND ANDCALCIUM FRoM OSTEoBLAST CULTURED INVITRo PERIoSTEUM Chuan